[发明专利]一种高纯度红镰霉素-6-O-β-龙胆二糖苷的制备方法

摘要

本发明涉及一种高纯度红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的制备方法，尤其是通过闪式提取从决明子中制备红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的工艺方法。所述制备方法以决明子为原料，包括提取、精制、干燥等步骤，其特征在于所述的制备方法包括以极性有机溶剂为溶媒、在10～60℃进行闪式提取，提取液经硅胶柱层析、反相色谱、冷冻干燥等工艺。相比已报道红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷制备方法，本发明制备工艺不仅温度低，有效成分不易破坏，而且时间短，提取率高，产品纯度高，且可用于大规模工业化生产。

主权项

一种高纯度红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的制备方法，尤其是通过闪式提取从决明子中制备红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的工艺方法。所述方法以决明子为原料，包括提取、精制、干燥等步骤，其特征在于所述的制备方法包括以下具体步骤：(1)取决明子，加入按药材质量计5～20倍溶剂，闪式提取1～3次，过滤，合并提取液，回收溶剂，得决明子提取物。(2)取步骤(1)所得决明子提取物，与硅胶以1∶1质量比拌样，洗脱剂氯仿‑甲醇，干法上样，洗脱3～5倍柱体积后，挖出上样层，继续用甲醇洗脱硅胶柱，通过TLC追踪检测，直至无红链霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷。回收洗脱液，得到红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷粗提物。(3)将步骤(2)红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷粗提物用体积浓度30％～80％甲醇水溶液溶解，配置成浓度为50～150mg/mL的供试品溶液，经0.45μm微孔滤膜过滤；采用柱长10～50cm、直径1～10cm的高效液相制备色谱柱进行分离，六通阀或泵进样，进样体积为1～50mL，以体积浓度为40％～70％的甲醇‑水为洗脱体系，流速控制在10～400mL/min，在线紫外检测，收集含有红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的洗脱液，减压浓缩干燥得黄色粉末I；(4)黄色粉末I以体积浓度为35％～60％甲醇水溶液的洗脱体系进行第二次高效液相制备，其他条件同步骤(3)，收集纯度大于98％的含有红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷的馏分；将上述馏分直接干燥即可得到纯度大于98％的红镰霉素‑6‑O‑β‑龙胆二糖苷对照品，其为黄色粉末。