[发明专利]一种酶法制备谷胱甘肽的工艺方法

摘要

本发明提供一种酶法制备谷胱甘肽的工艺方法，其特征在于包括以下步骤：1）向反应釜中加入L‑谷氨酸钠（L‑Glu.Na)，L‑半胱氨酸(L‑Cys)，甘氨酸(Gly)，三磷酸腺苷二钠（ATP.Na2），六水氯化镁（MgCl2.6H2O），六偏磷酸钠[(NaPO3)6 ]，二硫苏糖醇（DTT）和纯化水搅拌溶解；2）采用抽真空氮气置换的方法置换反应体系中的空气，置换完毕氮气保护整个反应体系；3）在25‑45℃、氮气保护下，用碱性溶液调节pH值至6.0‑8.0；4）加入反应液1%‑3%的谷胱甘肽酶液，氮气保护下、25‑45℃搅拌反应2‑4h，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在6.0～8.0。

主权项

一种酶法制备谷胱甘肽的工艺方法，其特征在于包括以下步骤：1）向反应釜中加入L‑谷氨酸钠（L‑Glu.Na)，L‑半胱氨酸(L‑Cys)，甘氨酸(Gly)，三磷酸腺苷二钠（ATP.Na2），六水氯化镁（MgCl2.6H2O），六偏磷酸钠[(NaPO3)6 ]，二硫苏糖醇（DTT）和纯化水搅拌溶解；2）采用抽真空氮气置换的方法置换反应体系中的空气，置换完毕氮气保护整个反应体系；在25‑45℃、氮气保护下，用碱性溶液调节pH值至6.0‑8.0；3）加入反应液1%‑3%的谷胱甘肽酶液，氮气保护下、25‑45℃搅拌反应2‑4h，反应过程中用碱性溶液控制反应体系pH值在6.0‑8.0；4）反应完毕，放料，料液离心除去不溶物，收集滤液；5）将得到的滤液通过超滤机进行超滤，收集超滤透析液；6）将超滤透析液调酸后上DA201‑C型大孔吸附树脂柱；该大孔树脂柱的径高比为0.05‑0.2，上样pH值为2.0‑3.5；7）用1‑3bv的纯化水冲洗大孔树脂柱；8）用50%‑95%的乙醇洗脱解吸附大孔树脂柱，收集茚三酮显色部分洗脱液；9）将收集的洗脱液30‑50℃减压浓缩，真空度≤‑0.09MPa，浓缩至GSH含量为15%‑30%；10）往浓缩液中加入0.5‑1.5倍量的有机溶剂，氮气保护下、0‑25℃（优选10‑15℃）搅拌析晶10‑24h（优选18‑20h）；11）析晶完毕，放料离心，乙醇洗涤，30‑50℃减压至真空度≤‑0.09MPa，干燥6‑8h，得谷胱甘肽粗品。