[发明专利]一种能够及时观察小麦黑胚病症状的接种鉴定方法

摘要

本发明公开了一种能够及时观察小麦黑胚病症状的接种鉴定方法。首先在小麦抽穗后，对小麦穗部进行剪壳处理以及对去壳后的小麦穗部进行杂菌隔离；将小麦黑胚病致病菌接种于含有PDA培养基的培养皿中进行暗培养，得到培养后的致病菌菌落；冲洗得到的致病菌菌落，经过滤、离心、调整孢子浓度后得到孢子悬浮液备用；在小麦籽粒满仁时，将孢子悬浮液喷洒在剪壳处理的穗子上，并用塑料袋将穗子罩上保湿；接菌后观察接种处理籽粒上病菌的侵染情况以及籽粒黑胚病症状的形成；小麦成熟时统计黑胚率，作为小麦黑胚病鉴定的结果。本发明方法不仅可以及时观察症状的产生情况，而且使鉴定结果更稳定可靠；并且根据浸染情况可以及时对小麦作出合理防治。

主权项

1.一种能够及时观察小麦黑胚病症状的接种鉴定方法，其特征在于，所述接种鉴定方法包括以下步骤：a、小麦穗部剪壳处理及杂菌隔离：在小麦抽穗后，将小麦穗上部及下部的小穗各去掉3个，将剩下小穗的颖壳从上面剪去1/2，并将麦芒剪掉，然后用硫酸纸袋将去壳的小麦穗罩上以隔离杂菌；b、小麦黑胚病致病菌的培养：将小麦黑胚病致病菌接种于含有PDA培养基的培养皿中，在25℃条件下暗培养12天；c、小麦黑胚病致病菌孢子悬浮液的制备：首先用无菌蒸馏水冲洗步骤b中PDA平板上培养得到的致病菌菌落，然后用纱布过滤至50mL的离心管中，在4℃、4000r/min的条件下离心5min，去上清液；接着加入10mL无菌蒸馏水摇匀再离心，去上清液；然后再加入5mL无菌蒸馏水，用血球计数板测定孢子浓度，根据测定的孢子浓度按比例加入无菌蒸馏水，调整至孢子浓度为3×10⁵个／mL，得到小麦黑胚病致病菌孢子悬浮液，于4℃冰箱保存备用；d、喷洒接菌及套袋保湿：在小麦籽粒满仁时，将步骤c制备的孢子悬浮液摇匀后均匀喷洒在步骤a中剪壳处理的穗子上，喷洒后用塑料袋将穗子罩上保湿5天；e、小麦黑胚病症状观察：接菌后每天观察步骤d接种处理籽粒上病菌的侵染情况以及籽粒黑胚病症状的形成；f、鉴定结果记录：小麦成熟时收获晾干，将步骤d接种处理的穗子手工脱粒，统计黑胚病籽粒占籽粒总数的百分比即为黑胚率，作为小麦黑胚病鉴定的结果。