[发明专利]利用近红外光谱法快速检测感冒灵颗粒的提取液的方法及应用

摘要

本发明涉及利用近红外光谱法快速检测感冒灵颗粒的提取液的方法，包括蒙花苷含量测定和/或绿原酸含量测定和/或固含量测定的步骤。本发明建立了感冒灵颗粒提取过程中蒙花苷含量、绿原酸含量和固含量的近红外在线分析方法，并将其应用于在线检测，实现了感冒灵颗粒提取过程的自动化检测和各指标含量的实时预测；所建立的模型预测精度高，准确度高，满足实际生产中定量分析的要求；该方法可以快速、高效地对提取过程的质量进行实时监测和控制，从而有利于保证最终产品质量的安全性、稳定性和有效性。

主权项

1.一种利用近红外光谱法快速检测感冒灵颗粒的提取液的方法，其特征在于，包括如下蒙花苷含量测定和绿原酸含量测定和固含量测定的步骤：A、蒙花苷含量测定包括以下步骤：(1)取已知蒙花苷含量的感冒灵颗粒的提取液，备用；(2)将所述感冒灵颗粒的提取液进行近红外光谱扫描，采集所述感冒灵颗粒的提取液的近红外光谱；(3)选取5392.27～5453.98cm‑1和6094.3～6503.1cm‑1特征波段下的光谱信息，应用化学计量学软件与所述已知蒙花苷含量的感冒灵颗粒的提取液的蒙花苷含量进行关联，采用偏最小二乘法建立近红外光谱与标准含量之间的定量校准模型；(4)按照所述步骤(2)的方法对未知感冒灵颗粒的提取液样品进行近红外光谱扫描，并选取5392.27～5453.98cm‑1和6094.3～6503.1cm‑1特征波段下的光谱信息，导入建立的定量校准模型获得所述未知感冒灵颗粒的提取液样品的蒙花苷含量值；B、绿原酸含量测定包括以下步骤：(1)取已知绿原酸含量的感冒灵颗粒的提取液，备用；(2)将所述感冒灵颗粒的提取液进行近红外光谱扫描，采集所述感冒灵颗粒的提取液的近红外光谱；(3)选取5423.2～5453.4cm‑1和6294.8～6503.1cm‑1特征波段下的光谱信息，应用化学计量学软件与所述已知绿原酸含量的感冒灵颗粒的提取液的绿原酸含量进行关联，采用偏最小二乘法建立近红外光谱与标准含量之间的定量校准模型；(4)按照所述步骤(2)的方法对未知感冒灵颗粒的提取液样品进行近红外光谱扫描，并选取5423.2～5453.4cm‑1和6294.8～6503.1cm‑1特征波段下的光谱信息，导入建立的定量校准模型获得所述未知感冒灵颗粒的提取液样品的绿原酸含量值；C、固含量测定包括以下步骤：(1)取已知固含量的感冒灵颗粒的提取液，备用；(2)将所述感冒灵颗粒的提取液进行近红外光谱扫描，采集所述感冒灵颗粒的提取液的近红外光谱；(3)选取5392.3～9403.7cm‑1特征波段下的光谱信息，应用化学计量学软件与所述已知固含量的感冒灵颗粒的提取液的固含量进行关联，采用偏最小二乘法建立近红外光谱与标准含量之间的定量校准模型；(4)按照所述步骤(2)的方法对未知感冒灵颗粒的提取液样品进行近红外光谱扫描，并选取5392.3～9403.7cm‑1特征波段下的光谱信息，导入建立的定量校准模型获得所述未知感冒灵颗粒的提取液样品的固含量值；所述蒙花苷含量测定、绿原酸含量测定和固含量测定的步骤(2)中，采用静态光谱采集法进行所述感冒灵颗粒的提取液的近红外光谱采集，具体条件为：光谱采集时间间隔为10min，以空气为参比，扫描次数为32次，分辨率为8cm‑1，扫描光谱范围为4000～12000cm‑1；所述蒙花苷含量测定、绿原酸含量测定和固含量测定的步骤(2)中，还包括对采集到的所述近红外光谱采用一阶导数法进行预处理的步骤；所述感冒灵颗粒的原料药组成为：三叉苦442‑540重量份、金盏银盘295‑349重量份、野菊花221‑270重量份、岗梅720‑750重量份、咖啡因0.36‑0.44重量份、对乙酰氨基酚18‑22重量份、马来酸氯苯那敏0.36‑0.44重量份、薄荷素油0.18‑0.22体积份；所述重量份与体积份的关系为g/mL；所述感冒灵颗粒的提取液的制备方法包括以下步骤：取选定重量份的三叉苦、金盏银盘、野菊花和岗梅，加水回流提取1‑3次，以三叉苦、金盏银盘、野菊花和岗梅的总重量为基准，每次加入3‑7重量倍量的水提取1‑3h，合并提取液，浓缩，即得；所述蒙花苷含量测定、绿原酸含量测定和固含量测定的步骤(3)中，还包括对建立的所述定量校准模型的预测性能进行评价的步骤，所述评价指标包括相关系数R、校正集均方差RMSEC、验证集均方根RMSEP、交叉验证均方根RMSECV和预测相对偏差RSEP，当R值越接近于1，RMSEC和RMSEP值越小且越接近时，评价模型稳定性越佳、预测精准度越高，则能够满足感冒灵颗粒的提取液直接分析的预测精度要求；反之，则不适用；所述蒙花苷含量测定的步骤(1)中，采用高效液相色谱法测定所述已知蒙花苷含量感冒灵颗粒的提取液的蒙花苷含量作为标准含量；所述绿原酸含量测定的步骤(1)中，采用高效液相色谱法测定所述已知绿原酸含量感冒灵颗粒的提取液的绿原酸含量作为标准含量；所述固含量测定的步骤(1)中，采用烘干法测定所述已知固含量感冒灵颗粒的提取液的固含量作为标准含量；所述采用高效液相色谱法测定所述已知蒙花苷含量感冒灵颗粒的提取液的蒙花苷含量的具体步骤为：(1)取所述感冒灵颗粒的提取液4～6mL，在转速12000‑14000r/min条件下离心8～12min，取上清液，作为供试品溶液；(2)精密称取1‑3mg蒙花苷对照品置于20mL量瓶中，加甲醇制成每mL含0.05～0.15mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以0.5％甲酸为流动相A、以乙腈为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0‑7min，A：B为87％：13％；7‑27min，A：B为87％：13％→70％：30％；27‑35min，A：B为70％：30％→60％：40％；35‑50min，A：B为60％：40％；流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长334nm；(4)精密吸取所述供试品溶液和对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定；所述采用高效液相色谱法测定所述已知绿原酸含量感冒灵颗粒的提取液的绿原酸含量的具体步骤为：(1)取所述感冒灵颗粒的提取液4～6mL，在转速12000‑14000r/min条件下离心8～12min，取上清液，作为供试品溶液；(2)精密称取1‑3mg绿原酸对照品置于20mL量瓶中，加甲醇制成每mL含0.05‑0.15mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液；(3)色谱条件：以0.5％甲酸为流动相A、以乙腈为流动相B按照如下程序进行梯度洗脱：0‑7min，A：B为87％：13％；7‑27min，A：B为87％：13％→70％：30％；27‑35min，A：B为70％：30％→60％：40％；35‑50min，A：B为60％：40％；流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长334nm；(4)精密吸取所述供试品溶液和对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定；所述采用烘干法测定所述已知固含量感冒灵颗粒的提取液的固含量的具体步骤为：取4～6mL所述感冒灵颗粒的提取液至于烘干至恒重的称量瓶，于105℃烘干5～7h，移至干燥器中冷却20～40min，称重；再于105℃下干燥0.5～1.5小时，冷却，称重；至连续两次称重差不超过5mg为止，计算固含量。