[发明专利]一种用于预防疫苗注射后耦合性出血的维生素K1的快速检测方法

摘要

本发明提供一种用于预防疫苗注射后耦合性出血的维生素K1的快速检测方法，其具体操作方法为：电极制备、利用电极进行测试、建立标准曲线、样品的制备和测定：本发明分别采用修饰电极和未修饰玻碳电极进行维生素K1的电化学反应，比较发现，修饰电极对维生素K1的电流响应远大于未修饰玻碳电极，这表明纳米二氧化钛对维生素K1的响应具有一定的增敏作用，这主要是由于纳米二氧化钛膜电极的多孔结构，使得其比表面积增大，从而吸附特性增强，可以富集更多的维生素K1。本发明涉及的修饰电极检测血清中维生素K1的方法中，血清不需要经过复杂的前处理，每个样品检测时间仅需100s，方便快捷，能充分满足大量血清样品检测的需求。

主权项

一种用于预防疫苗注射后耦合性出血的维生素K1的快速检测方法，其具体操作方法为：（1）电极制备：所述电极采用纳米二氧化钛修饰玻碳电极，所述纳米二氧化钛修饰玻碳电极的制备方法为，将玻碳电极用0.1‑0.2μm的三氧化二铝粉抛光，将纳米二氧化钛按照12g/L的浓度进行配置，纳米二氧化钛粒径为15到17nm之间，选择超声法对二氧化钛溶液进行分散30min，形成乳白色分散液，选择15μl分散液作为最佳覆盖量，具体方法是将15μl上述分散液滴加在玻碳电极表面，室温下风干，重复两次；（2）利用电极进行测试，制作10支修饰电极，检测浓度为1.0ng/ml的维生素K1标准液,得到的电流的平均值为7.597±0.14μA（n=10,RSD=1.85%），然后利用伏安法进行维生素K1检测；（3）建立标准曲线：配制不同维生素K1含量的标准溶液，加入支持电解液中，通入高纯氮气除氧，用电化学工作站对每个标准溶液进行电压扫描，用标准溶液于 ‑0.45V 处的峰电流值与维生素K1含量建立标准曲线，维生素K1标准品的纯度为99%；（4）样品的制备和测定：将4ml人血样品置7ml的塑料离心管中，高速离心10min,转速5000rpm，取上清液于35~40摄氏度水浴上用氮吹仪吹干，残余用5.0mol/L NaAc‑HAc缓冲液2ml溶解，待用，将被测样品加入支持电解液中，样品液用氮气纯化10min,在与建立标准曲线相同的条件下测定其于 ‑0.45V 处的峰电流值，由标准曲线得到该峰电流值对应的维生素K1含量即为被测样品的维生素K1含量。