[发明专利]一种黑金刚土豆花青苷单体的制备方法

摘要

本发明公开了一种黑金刚土豆花青苷单体的制备方法，包括原料的预处理、黑金刚土豆花青苷的粗提取、黑金刚土豆花青苷的精制、黑金刚土豆花青苷单体的制备等步骤。本发明采用“大孔树脂粗纯化+溶剂萃取+高效液相色谱分离”的三步法实现黑金刚土豆花青苷单体的分离，工艺简便，设备简单，操作可控，成本低，便于在基层单位规模化生产；本发明涉及高效液相色谱法制备高纯度花青苷单体，特别适合为黑金刚土豆色素的精准定量提供标准品，这将解决购买进口标准品价格昂贵的问题。

主权项

一种黑金刚土豆花青苷单体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)原料的预处理：取无腐烂的土豆洗净去皮，40‑50℃烘干，打粉，过40‑80目筛，备用；(2)黑金刚土豆花青苷的粗提取：取步骤(1)得到的土豆粉用提取液浸提，取浸提液于4000‑8000r/min离心10‑15min，得到沉淀物和上清液，沉淀物中按相同条件加入上述提取液重复提取1次，合并2次上清液即为黑金刚土豆花青苷粗提液；(3)黑金刚土豆花青苷的精制：将步骤(2)得到的黑金刚土豆花青苷粗提液以1‑3mL/min的流速经过填充有大孔树脂的吸附柱，黑金刚土豆花青苷被大孔树脂吸附饱和，用水或1.2mmol/L的HCl溶液以1‑3mL/min的流速洗涤大孔树脂柱，再用质量百分比浓度为60％‑80％的乙醇溶液以1‑3mL/min的流速洗脱被大孔树脂吸附的黑金刚土豆花青苷，收集洗脱液；在50℃条件下减压浓缩至原体积的1/3，得到黑金刚土豆花青苷浓缩液；将浓缩液冷冻干燥得到紫红色黑金刚土豆花青苷粗粉末。(4)黑金刚土豆花青苷单体的制备：用体积百分比为0.3％的甲酸溶液:乙腈按照体积比等于9:1的溶剂将步骤(3)得到的花青苷粗粉末溶解，加入1‑2倍体积的乙酸乙酯萃取3次，弃乙酸乙酯层，色素部采用高效液相色谱法分离，收集单体，将收集液在50℃条件下减压浓缩至原体积的1/3，冷冻干燥，即得黑金刚土豆花青苷单体；步骤(2)所述的提取液为盐酸酸化的水溶液或柠檬酸酸化的水溶液，其中HCl的浓度为0.1mol/L‑0.3mol/L，或柠檬酸的质量百分比浓度为2％‑4％。