[发明专利]一种基因组DNA提取方法

摘要

本发明公开了一种基因组DNA提取方法，包括取新鲜材料剪碎，加液氮速冻，快速研磨，获得低温粉料；将低温粉料转移到1.5mL离心管中，加20%SDS 20mL，蛋白酶K（2mg/mL）20mL，混匀；加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀4min；离心抽提溶解等步骤；最终获得DNA溶解液，检测DNA质量后将DNA溶解分装到1.5mL离心管冷冻保藏。本发明热的DNA提取方法，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中快速高效的获得DNA，DNA质量高，经酶切后不仅可用于Southern分析，还可用于PCR的模板、文库构建等后续研究，具有很好的实用性。

主权项

一种基因组DNA提取方法，其特征在于，包括以下步骤1）取新鲜材料剪碎，加液氮速冻，快速研磨，获得低温粉料；2）将低温粉料转移到1.5mL 离心管中，加20%SDS 20mL，蛋白酶K（2mg/mL）20mL，混匀；3）55℃水浴2‑3h；4）加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀4min；5）离心5500g 12min，取上层水相到另一1.5mL 离心管中；6）加等体积饱和酚，混匀，离心5300g 12min，取上层水相到另一管中；7）加等体积酚/氯仿，轻轻混匀，离心5500g 12min，取上层水相到另一管中；如水相仍不澄清，可重复此步骤数次；8）加等体积氯仿，轻轻混匀，离心5500g 12min，取上层水相到另一管中；9）加1/10体积的3M醋酸钠（pH5.2）和2.5倍体积的无水乙醇，轻轻倒置混匀；10）待絮状物出现后，离心5500g 6min，弃上清液；11）沉淀用75%乙醇洗涤，离心5500g 2min，弃上清液；12）室温下挥发乙醇，待沉淀将近透明后加50‑100mLTE溶解过夜；13）取1uL DNA溶解液检测DNA质量；14）DNA质量符合要求后，将DNA溶解分装到1.5mL离心管冷冻保藏。