[发明专利]乌塌菜总RNA的高效提取方法在审
申请号: | 201610087704.6 | 申请日: | 2016-02-16 |
公开(公告)号: | CN105543215A | 公开(公告)日: | 2016-05-04 |
发明(设计)人: | 汪承刚;方柔;刘思嘉;陈国户;袁凌云;朱世东;葛继涛 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京市京大律师事务所 11321 | 代理人: | 刘向辉;王凝 |
地址: | 230036 安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明涉及乌塌菜总RNA的高效提取方法,通过向乌塌菜叶片中加入液氮研磨、提高离心转速、使用不同浓度乙醇洗涤RNA沉淀等操作,可实现高纯度高浓度、且无降解的乌塌菜总RNA的提取。本发明首次提供一套科学系统地从乌塌菜叶片中提取总RNA的方法,不仅提高了提取效率,又可有效避免提取过程中的污染,导致RNA降解,采用本方法仅需50-55min即可完成乌塌菜总RNA的提取,获得的高纯度高浓度无降解的总RNA,有利于后续研究的深入。 | ||
搜索关键词: | 乌塌菜总 rna 高效 提取 方法 | ||
【主权项】:
乌塌菜总RNA的高效提取方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取乌塌菜叶片加入液氮快速研磨成粉末,倒入离心管中;2)向上述粉末中加入Trizol裂解液,将离心管置于旋窝机中震荡后室温静置,然后4℃离心;3)将上清液置于另一离心管中,向上清液中加氯仿,震荡后室温静置,然后4℃离心;4)将上清液转移至另一离心管中,加异丙醇上下颠倒摇匀,‑20℃静置后,4℃离心;5)弃去上清液,用不同浓度的乙醇洗RNA沉淀,4℃离心,弃去上清液,RNA置于超净工作台室温干燥后,用不含RNA酶的灭菌水溶解,‑80℃保存。
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