[发明专利]杏鲍菇原始母种的超低温保藏方法

摘要

本发明公开一种杏鲍菇原始母种的超低温保藏方法，A、制作PDA斜面试管，试管壁上的水珠和水分蒸发消失；B、把原始母种转接到PDA培养基，在恒温箱里22±1℃，黑暗培养16‑18天，使菌丝基本长满培养基；C、按甘油：吐温‑80：纯净水＝15％‑30％：0‑5％：80‑65％的容积比配制甘油剂，分装到耐高、低温的塑料试管中至其1/2‑4/5的总容量,进行高压灭菌后冷却；D、将带菌丝的数个培养基块，转移到试管里，甘油剂没过菌种块，密封；E、将塑料试管在‑18±2℃下先预冷1‑2天，再转移到‑80±5℃的冰箱里长期保藏。本发明能长达8年对杏鲍菇原始母种超低温保藏，并能保证其菌种活力和遗传的稳定性，不易变异，成本低。

主权项

1.一种杏鲍菇原始母种的超低温保藏方法，其特征在于，包括以下步骤：A、制作PDA斜面试管，做好后经过无菌检测，把试管壁上的水珠和水分蒸发消失；B、把原始母种转接到上述经检测合格的PDA培养基上面，在恒温箱里22±1℃，黑暗培养16‑18天，使菌丝基本长满培养基；C、按甘油：吐温‑80：纯净水＝15％‑30％：0‑5％：65‑80％的容积比配制甘油剂，再将其分装到耐高、低温的塑料试管中；每个塑料试管装甘油剂至其1/2‑4/5的总容量,进行高压灭菌后冷却，无菌保藏备用；D、在超净工作台内，无菌的条件下把PDA斜面试管内的培养基分切成培养基块，再将带菌丝的数个培养基块，转移到无菌的塑料试管里面，以甘油剂没过菌种块为标准，盖上盖子，用封口膜进行密封；E、将塑料试管在‑18±2℃下先预冷1‑2天后，再转移到‑80±5℃的冰箱里长期保藏；所述A步骤中，PDA斜面试管内的PDA培养基含食用级盐0.8％‑1.4％。