[发明专利]一种基于蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物及其应用

摘要

本发明提供一种基于蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物，包括磁性微珠和蛋白纳米线，所述蛋白纳米线表面包括至少一种功能配体和至少一种连接配体，所述蛋白纳米线通过连接配体连接在磁性微珠表面。本发明利用纳米线较大的比表面积，展示在其上的配体形成3D高密度固定，一方面提高配体数量，利用高密度展示形成多价效应，提高特异性配体的结合力；另一方面通过自组装的方式实现抗原或抗体等分子的定向固定，最大程度的保留功能分子活性，减少常规化学交联的损伤，从而提高对样品中待测目标的捕获效率。复合物通过连接配体将蛋白纳米线与磁性微珠相连，利用磁性微珠快速分离的性质，减少检测时间，进而实现快速高通量的病原筛查或疾病检测。

主权项

一种基于蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物的制备方法，包括以下步骤：（1）通过分子克隆将成线蛋白的自组装结构域与至少一种功能配体融合后形成融合蛋白基因LP‑L，经表达纯化后得到融合蛋白LP‑L；（2）通过分子克隆将成线蛋白的自组装结构域与至少一种连接配体融合后形成融合蛋白基因LP‑CL，经表达纯化后得到融合蛋白LP‑CL；或者，通过分子克隆将成线蛋白的自组装结构域与至少一种功能配体融合后，再与至少一种连接配体融合，形成融合蛋白基因LP‑CL，经表达纯化后得到融合蛋白LP‑CL；（3）将步骤（2）得到的融合蛋白LP‑CL破碎作为种子，并将所述种子连接在磁性微珠表面，得到种子‑磁性微珠复合物；（4）将步骤（3）得到的种子‑磁性微珠复合物表面进行种子诱导自组装，将步骤（1）得到的融合蛋白LP‑L组装成蛋白纳米线，得到所述基于蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物：其中，所述蛋白纳米线的3D探针‑磁性微珠复合物，包括磁性微珠和蛋白纳米线，所述蛋白纳米线通过成线蛋白自组装形成，且所述蛋白纳米线表面包括至少一种功能配体和至少一种连接配体，所述蛋白纳米线通过连接配体连接在磁性微珠表面。