[发明专利]一种制备具有免疫调节和抗肿瘤活性的低分子牡蛎多糖的方法

摘要

本发明公开了一种制备具有免疫调节和抗肿瘤低分子牡蛎多糖的方法。该方法包括新鲜牡蛎肉的清洗，高温高压热水浸提，sevage法除蛋白，30％‑70％乙醇沉淀，沉淀溶于水后，经‑30℃至‑80℃反复冻融离心，取上清经Sepharose CL‑6B凝胶柱层析纯化后冷冻干燥或烘干。本多糖可显著提高肿瘤浸润树突状细胞MHC‑II、CD86等分子的表达，促进肿瘤浸润树突状细胞所致CD4+T细胞的增殖和IL‑2、IFN‑γ等细胞因子的产生，而且，本多糖能明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长。本发明的低分子牡蛎多糖具有显著的免疫调节和抗肿瘤作用，在食品及医药行业具有广阔的应用前景。

主权项

一种低分子量牡蛎多糖的提取方法，包括如下步骤：(1)将新鲜牡蛎去外壳，牡蛎肉用清水冲洗；(2)将步骤(1)所得的牡蛎肉进行高压热水浸提，提取温度110‑130℃，提取压力为2000‑2500 hPa，时间1‑3小时，过滤得提取液上清液；(3)将步骤(2)所得上清液减压浓缩，用sevage法去蛋白；(4)将步骤(3)去蛋白后所得液体减压浓缩采用乙醇沉淀；(5)将步骤(4)所得沉淀加蒸馏水溶解；(6) 将步骤(5)所得溶解液经‑30℃–‑80℃反复冻融和离心2‑3次，去除沉淀，取上清液，减压浓缩；(7) 步骤（6）减压浓缩后的溶液经Sepharose CL‑6B凝胶柱层析纯化，用双蒸水洗脱，采用硫酸‑苯酚法检测，收集在490nm最大吸收峰的洗脱液，所得洗脱液经冷冻干燥或烘干，即为低分子量牡蛎多糖；所述低分子量牡蛎多糖为分子量为1900‑2000D的牡蛎多糖。