[发明专利]一种制备具有免疫调节和抗肿瘤活性的低分子牡蛎多糖的方法有效
申请号: | 201610038109.3 | 申请日: | 2016-01-20 |
公开(公告)号: | CN105418789B | 公开(公告)日: | 2018-04-06 |
发明(设计)人: | 钟鸣;王婷婷;王光辉;车建途 | 申请(专利权)人: | 济宁医学院 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P35/00;A61P37/02;A61K31/716 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 272000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 具有 免疫调节 肿瘤 活性 分子 牡蛎 多糖 方法 | ||
1.一种低分子量牡蛎多糖的提取方法,包括如下步骤:
(1)将新鲜牡蛎去外壳,牡蛎肉用清水冲洗;
(2)将步骤(1)所得的牡蛎肉进行高压热水浸提,提取温度110-130℃,提取压力为2000-2500 hPa,时间1-3小时,过滤得提取液上清液;
(3)将步骤(2)所得上清液减压浓缩,用sevage法去蛋白;
(4)将步骤(3)去蛋白后所得液体减压浓缩采用乙醇沉淀;
(5)将步骤(4)所得沉淀加蒸馏水溶解;
(6) 将步骤(5)所得溶解液经-30℃–-80℃反复冻融和离心2-3次,去除沉淀,取上清液,减压浓缩;
(7) 步骤(6)减压浓缩后的溶液经Sepharose CL-6B凝胶柱层析纯化,用双蒸水洗脱,采用硫酸-苯酚法检测,收集在490nm最大吸收峰的洗脱液,所得洗脱液经冷冻干燥或烘干,即为低分子量牡蛎多糖;
所述低分子量牡蛎多糖为分子量为1900-2000D的牡蛎多糖。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)中,高压热水浸提的蒸馏水与牡蛎肉的液料比为3-6:1。
3.根据权利要求2所述方法,其特征在于,步骤(2)中,高压热水浸提的蒸馏水与牡蛎肉的液料比为5:1。
4.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(2)中,高压热水浸提提取温度121℃,提取压力为2300hPa,时间1-3小时,提取次数1-3次。
5.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(3)中,上清液在40℃条件下减压浓缩,用sevage法去蛋白3-5次。
6.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(4)中,用最终浓度30%–70%乙醇沉淀。
7.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(5)中,沉淀按液料比5:1加蒸馏水溶解。
8.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(6)中,每一次离心条件均为10,000rpm, 10min。
9.权利要求1-8任一项所述提取方法制备得到的低分子量牡蛎多糖。
10.权利要求9所述低分子量牡蛎多糖用于制备免疫调节的产品的用途,所述免疫调节为促进IL-2、IFN-γ的产生。
11.权利要求9所述低分子量牡蛎多糖用于制备抗黑色素瘤产品中的用途。
12.权利要求9所述低分子量牡蛎多糖用于制备抗黑色素瘤药物中的用途。
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