[发明专利]一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法

摘要

本发明涉及一种中药复方制剂的质量测定方法，特别是涉及一种治疗血尿的中药组合物质量检测方法。本发明提供的技术方案是一种治疗血尿的中药组合物质量检测方法，包括对黄柏、白茅根、肾茶和小蓟中蒙花苷；本发明还提供一种对黄柏中的盐酸小檗碱和肾茶中的迷迭香酸进行含量测定的方法，采用高效液相色谱法。本发明中，薄层色谱法定性检测出治疗血尿的中药组合物中白茅根、黄柏、肾茶和小蓟，该方法简单稳定。高效液相色谱法测定黄柏中的盐酸小檗碱和肾茶中的迷迭香酸的含量，方法简便，重复性和稳定性好，结果准确，作为中药复方制剂成分含量检测方法，增强了整个质量控制方法的合理性和可靠性。

主权项

一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法，中药组合物包括黄柏、白茅根、肾茶和小蓟中蒙花苷，其特征在于，包括对黄柏、白茅根、肾茶和小蓟中蒙花苷鉴别；所述黄柏鉴别步骤如下：取治疗血尿的中药组合物4g，加氨试液2ml，三氯甲烷10ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液，另取黄柏对照药材0.1g，加浓氨试液1ml，三氯甲烷5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，制成对照药材溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲醇：异丙醇：浓氨试液＝6：3：1.5：1.5：0.5为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述白茅根鉴别步骤如下：取治疗血尿的中药组合物2g，加乙酸乙酯20ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使其溶解，作为供试品溶液，另取白茅根对照药材0.5g，加乙酸乙酯10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯0.5ml使其溶解，作为对照药材溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷：乙酸乙酯＝4：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇液，105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述肾茶鉴别步骤如下：取治疗血尿的中药组合物5g，加水20ml，超声处理25分钟，离心，取上清液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使其溶解，作为供试品溶液，另取肾茶对照药材2g，加水40ml，煮沸30分钟，滤过，滤液浓缩至20ml，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使其溶解，制成对照药材溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲酸＝20：20：1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；所述小蓟中蒙花苷鉴别步骤如下：取治疗血尿的中药组合物0.5g，加甲醇10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用水3ml使溶解，加在聚酰胺柱上，用水50ml洗脱，弃去水洗脱液，再用乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使其溶解，作为供试品溶液，另取蒙花苷对照品，加甲 醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液，按照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各1μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酰丙酮：丁酮：乙醇：水＝1：3：3：13为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，晾干1小时，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；还包括对黄柏中的盐酸小檗碱和肾茶中的迷迭香酸进行含量测定，含量测定方法采用高效液相色谱法，步骤如下：所述黄柏中的盐酸小檗碱的含量测定：高效液相色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：0.1％磷酸溶液＝45：55为流动相；每100ml的0.1％磷酸溶液加十二烷基磺酸钠0.1g，检测波长为349nm，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品，精密称定，加盐酸：甲醇＝1：100的混合溶液制成1ml含0.1mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取装量差异项下的治疗血尿的中药组合物，混匀，取0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸：甲醇＝1：100的混合溶液50ml，称定重量，超声处理40分钟，放冷，用盐酸：甲醇＝1：100的混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；所述肾茶中的迷迭香酸的含量测定：高效液相色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，流动相梯度为0min，流动相A为9％，流动相B为91％；流动相梯度为40min，流动相A为30％，流动相B为70％；检测波长为330nm理论板数按迷迭香酸峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备：取迷迭香酸对照品，精密称定，加50％甲醇制成1ml含20μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取治疗血尿的中药组合物，混匀，取2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，置水浴上加热回流1小时，放冷，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得治疗血尿的中药组合物的每粒含黄柏以盐酸小檗碱计，不得少于2.5mg本品每粒含肾茶以迷迭香酸计，不得少于0.08mg。