[发明专利]一种同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法

摘要

一种同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法，采用高效液相色谱仪，二极管阵列检测器或DAD甲测器与示差检测器串联使用，紫外波长为190-280nm，分析柱氢离子交换柱，流动相是水相A：0.001mol/L-0.005mol/L的硫酸溶液；有机酸B：乙腈；且A的体积百分比为96%~100%，B的体积百分比为4%-0%，流速为为0.3-0.5mL/min，进样量为5-20μl。检测时间：55min。采用外标法定量分析计算水果中12种有机酸和3种糖的含量。本发明具有组份峰呈现性好，分辨率高，重复性好，可表征各种类型的有机酸和糖的组成，结构特征的优点。

主权项

一种同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）标准样品溶液的制备分别称取色谱纯的草酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、奎尼酸、富马酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、苯甲酸这12种有机酸，以及葡萄糖、果糖、蔗糖这3种糖，然后用流动相水相制备该12种有机酸标准品不同浓度梯度在0.01‑1 mg/mL的标准样品溶液，以及3种糖组分不同浓度梯度在0.1‑75 mg/mL的标准样品溶液；（2）待测液的制备鲜样：称取10 g鲜样置于组织捣碎机中，并加入100 ml 80 wt%乙醇溶液匀浆1 min，取10 ml的匀浆以3000 rpm/min离心10 min后分出上清液，将上清液转入50 mL容量瓶中，且离心的残渣再用80 wt%乙醇溶液洗涤两次，每次15 ml，离心10 min；合并上清液，用80 wt %乙醇溶液定容混匀得提取液；取5.00 mL提取液于蒸发皿中，且于70 ℃下恒温水浴蒸发乙醇，蒸发获得的残留物用重蒸水定容到10 mL混匀得样液，将该样液过0.45 μm滤膜得待测液；干样：称2～3 g干样并研磨过60目，接着以80 wt%乙醇溶液为溶剂，于80 ℃下恒温水浴浸提30 min，并离心收集提取液，然后将提取液蒸干，蒸干获得的物质采用2 ml超纯水溶解得样液，将该样液过0.45 μm滤膜即获待测液；（3）使用包括四元泵、柱温箱、DAD检测器/示差检测器以及工作站所组成的HPLC仪器，在氢离子交换柱上，以乙腈‑硫酸溶液为流动相等度洗脱分离各种有机酸，色谱条件如下：分析柱： 氢离子交换柱；流动相：水相A：0.001 mol/L‑0.005 mol/L的硫酸溶液；有机相B：乙腈；且A的体积百分比为100‑96%，B的体积百分比为为0‑4%；流速：0.3‑0.5 mL/min；洗脱方式：等度洗脱；检测波长：190 nm‑280 nm；温度：25‑50 ℃；进样体积：5‑20 μL；检测时间：55 min；（4）测定：分别取步骤（1）制备的标准样品溶液及步骤（2）制备的待测液，采用步骤（3）的色谱条件进行进样检测，之后采用外标法定量分析计算果实或果酒中12种有机酸及3种糖的含量。