[发明专利]一种同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法

权利要求书

1.一种同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）标准样品溶液的制备

分别称取色谱纯的草酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、奎尼酸、富马酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、苯甲酸这12种有机酸，以及葡萄糖、果糖、蔗糖这3种糖，然后用流动相水相制备该12种有机酸标准品不同浓度梯度在0.01-1mg/mL的标准样品溶液，以及3种糖组分不同浓度梯度在0.1-75mg/mL的标准样品溶液；

（2）待测液的制备

鲜样：称取10g鲜样置于组织捣碎机中，并加入100ml80wt%乙醇溶液匀浆1min，取10ml的匀浆以3000rpm/min离心10min后分出上清液，将上清液转入50mL容量瓶中，且离心的残渣再用80wt%乙醇溶液洗涤两次，每次15ml，离心10min；合并上清液，用80wt%乙醇溶液定容混匀得提取液；取5.00mL提取液于蒸发皿中，且于70℃下恒温水浴蒸发乙醇，蒸发获得的残留物用重蒸水定容到10mL混匀得样液，将该样液过0.45μm滤膜得待测液；

干样：称2～3g干样并研磨过60目，接着以80wt%乙醇溶液为溶剂，于80℃下恒温水浴浸提30min，并离心收集提取液，然后将提取液蒸干，蒸干获得的物质采用2ml超纯水溶解得样液，将该样液过0.45μm滤膜即获待测液；

（3）使用包括四元泵、柱温箱、DAD检测器/示差检测器以及工作站所组成的HPLC仪器，在氢离子交换柱上，以乙腈-硫酸溶液为流动相等度洗脱分离各种有机酸，色谱条件如下：

分析柱：氢离子交换柱；

流动相：水相A：0.001mol/L-0.005mol/L的硫酸溶液；有机相B：乙腈；且A的体积百分比为100-96%，B的体积百分比为为0-4%；

流速：0.3-0.5mL/min；

洗脱方式：等度洗脱；

检测波长：190nm-280nm；

温度：25-50℃；

进样体积：5-20μL；

检测时间：55min；

（4）测定：分别取步骤（1）制备的标准样品溶液及步骤（2）制备的待测液，采用步骤（3）的色谱条件进行进样检测，之后采用外标法定量分析计算果实或果酒中12种有机酸及3种糖的含量。

2.根据权利要求1所述的同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的氢离子交换柱为RezexROA-OrganicAcidH+NewColumn250×4.6mm。

3.根据权利要求1所述的同时测定果实或果酒中的有机酸和可溶性糖的方法，其特征在于：所述的果实包括枇杷、葡萄、香蜜果、五味子、柑橘中的一种；所述的果酒为葡萄酒。