[发明专利]人工肝细胞微流体微囊制备方法及其微流体微囊发生装置

摘要

本发明涉及组织工程和实验室设备技术领域，特别涉及一种人工肝细胞微流体微囊制备方法及其该方法的专用设备—一种微流体微囊发生装置。本发明利用海藻酸钠与氯化钙反应生成海藻酸钙水凝胶的化学原理，通过设计微流体装置，借助连续相液体对分散相液体的剪切力、表面张力等作用形成大小稳定的微囊。本发明制备得到的人工肝细胞微囊，能较长时间的维持囊内种子细胞功能，在体外肝衰竭类似血浆影响下和体内炎症因素作用下依然能代谢有害物质，保持一定的肝功能，有望应用于生物人工肝系统和细胞治疗。

主权项

1.一种人工肝细胞微流体微囊制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：A、海藻酸钠混合溶液的制备：用生理盐水溶解海藻酸钠配制1.5％‑2.0％的海藻酸钠溶液，混入磁性物质，使磁性物质在海藻酸钠溶液中的重量体积比为1‑5mg/mL，用钴60照射除菌；再以1：15‑30的体积比往上述溶液中加入胶原，混合均匀，4℃冰箱保藏备用；B、微囊的制备分散相一AS，为种子细胞充分混匀于步骤A得到的海藻酸钠混合溶液中得到分散相一；分散相二IS，1％‑3％的氯化钙溶液，除菌；连续相OI，不溶于水的油性介质，除菌；将AS、IS、OI分别装入注射器中，用微量推注泵推注入微流体通道中；在微流体通道中形成初级微囊后进入油水分离器，待微囊表面形成一层钙化的外膜后，进行油水分离，并用生理盐水洗涤；移至旋转成膜台，依次通过0.1％多聚赖氨酸溶液、生理盐水、0.15％海藻酸钠溶液、生理盐水、55mmol/L的柠檬酸钠溶液、生理盐水，得到最终的微囊。