[发明专利]一种圆叶鸟巢蕨的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种圆叶鸟巢蕨的组培快繁方法，包括以下步骤：愈伤组织诱导：将外植体材料清洗后，在氯化汞溶液中表面灭菌7-10min，用水冲洗，切成块状接种于诱导培养基，45天后诱导产生愈伤组织；增殖培养：将愈伤组织接种于增殖培养基进行增殖；孢子体诱导：将增殖培养后的愈伤组织接种于分化培养基，处理30天后获得发芽的孢子体；生根培养：待孢子体的叶片长到2-3cm后，接种于生根培养基培养成苗，30d后苗的基部长出棕色的根；炼苗移栽：待苗长有2～3条根，高度在4cm以上时，进行炼苗移栽。通过培养基配方改进，愈伤组织诱导率为65.29％，增殖率为8.71％，分化率为达到88.35％，生根率达到91.21％，成活率达95.3％以上。

主权项

一种圆叶鸟巢蕨的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)愈伤组织诱导：将外植体材料清洗后，在氯化汞溶液中表面灭菌7‑10min，用水冲洗，切成块状接种于诱导培养基，45天后诱导产生愈伤组织；所述外植体材料为未展开的圆叶鸟巢蕨嫩叶，所述诱导培养基成分为1/2MS改良培养基、1.0‑2.0mg/L 6‑BA和0.5‑1.0mg/L NAA；(2)增殖培养：将愈伤组织接种于增殖培养基进行增殖，增殖培养基成分为MS基本培养基、0.5‑1.0mg/L 6‑BA和0.1‑0.5mg/L NAA；孢子体诱导：将增殖培养后的愈伤组织接种于分化培养基，处理30d天后获得发芽的孢子体，分化培养基成分为MS基本培养基，0.4‑0.5mg/L 6‑BA和0.1‑0.2mg/L NAA；(3)生根培养：待孢子体的叶片长到2‑3cm后，接种于生根培养基培养成苗，30d后苗的基部长出棕色的根，生根培养基成分为1/2MS改良培养基、0.1‑0.2mg/L NAA、10‑20g/L蔗糖和0.5‑0.8g/L活性炭；(4)炼苗移栽：待苗长有2～3条根，高度在4cm以上时，进行炼苗移栽，置于太阳光下炼苗5‑7d后，取出瓶苗，洗净根部附着的生根培养基，晾干并种植于灭菌后的培养基质中，培养基质为椰糠、泥炭土和火山岩的混合物；其中，所述1/2MS改良培养基包含825mg/L NH₄N0₃和950mg/L KNO₃。