[发明专利]一种米酵菌酸的液相色谱-串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种米酵菌酸的液相色谱-串联质谱检测方法，包括下列步骤：(1)样品前处理；(2)富集和净化；（3）LC-MS/MS检测。本发明的方法操作简便、定性定量能力较强，可作为检测食品质量和评估食品安全风险的可靠方法。

主权项

一种米酵菌酸的液相色谱‑串联质谱检测方法，其特征在于，包括下列步骤：(1)样品前处理准确称取经过粉碎、均质过的待检测样品2.0g，加入20mL甲醇溶液均质提取米酵菌酸，再加入0.5g氯化钠；以上样品密闭避光振荡1h，再超声10min，4000r/min离心3min，取上清液。(2)富集和净化首先以1mL甲醇和1mL超纯水活化弱阴离子交换柱，活化过程流速控制在1‑2滴/秒，取2mL上清液过弱阴离子交换柱进行富集，流速控制在1滴/秒，接着再以25mM乙酸铵(pH6‑7)溶液和甲醇各1mL淋洗弱阴离子交换柱，以去除杂质，最后以1mL 5％甲酸甲醇溶液洗脱米酵菌酸，待液相色谱‑串联质谱(LC‑MS/MS)检测。(3)LC‑MS/MS检测液相条件Phenomenex C18色谱柱(3.0mm×150mm，5μm)，柱温30℃；进样量10μL；流动相A为水(含有体积比是的0.1％甲酸，5mmol/L甲酸铵)，B为95％乙腈(含有体积比是的0.1％甲酸，5mmol/L甲酸铵)；梯度洗脱；梯度洗脱条件见下表：时间/min流速/μL·min^‑1A/％B/％04007030340059584005958.014007030134007030质谱条件离子化方式为电喷雾离子化负模式(ESI‑)；多反应监测模式(MRM)；碰撞气压力(CAD)：6；气帘气压力(CUR)：10；电喷雾电压(IS)：‑4500V；离子源温度(TEM)：600℃；化合物的多反应监测离子对及质谱相关参数如下表所示：*为定量离子。