[发明专利]线粒体12S rRNA基因组全长序列测序分型的方法及试剂盒

摘要

本发明属于生物技术检测领域，公开了一种线粒体12S rRNA基因组全长序列测序分型的方法及试剂盒。首先由一对PCR扩增引物对分型目的区域即954bp基因组全长序列进行PCR扩增反应，然后通过四条正向和反向测序引物对扩增产物进行双向测序反应。本发明的贡献在于建立精确、稳定、可靠的12S rRNA基因组全长序列的测序分型方法。所获得的碱基序列峰图中无背景信号和杂峰，易于识别和结果判读。该方法可对12S rRNA基因组全长序列进行测序分型，解决了测序分型中出现的模棱两可结果；该方法适合于12S rRNA基因分型，以及12S rRNA基因的群体遗传学、进化学以及疾病相关性等基础和应用研究工作。

主权项

1.线粒体12S rRNA基因组全长序列测序分型的试剂盒，包括PCR扩增引物和测序引物，其特征在于，所述PCR扩增引物包括上游引物12S rRNA‑PCR‑F和下游引物12S rRNA‑PCR‑R；其中，上游引物12S rRNA‑PCR‑F的序列为5’‑ARCTTACCTCCTCAAAGCAATAC‑3’，下游引物12S rRNA‑PCR‑R的序列为5’‑GCTAGGTTTAGCTCAGAGCGG‑3’；所述测序引物包括：第一条正向测序引物12S rRNA‑SBT‑F1，其序列为：5’‑ARCTTACCTCCTCAAAGCAATAC‑3’，第一条反向测序引物12SrRNA‑SBT‑R1，其序列为：5’‑TAAGCTGTGGCTCGTAGTG‑3’；第二条正向测序引物12S rRNA‑SBT‑F2，其序列为：5’‑CTGCTCGCCAGAACACTAC‑3’，第二条反向测序引物12S rRNA‑SBT‑R2，其序列为：5’‑GCTAGGTTTAGCTCAGAGCGG‑3’。