[发明专利]一种真核细胞模型的制备方法有效
申请号: | 201510869545.0 | 申请日: | 2015-12-01 |
公开(公告)号: | CN105255809B | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
发明(设计)人: | 韩晓军;宗薇 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨工业大学 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 侯静 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种真核细胞模型的制备方法,涉及一种细胞模型的制备方法。本发明是要解决现有的细胞模型仅模拟了原核细胞,不满足于生命进化的研究的问题。方法:一、制备单室磷脂泡囊;二、制备人造真核细胞模型;三、PCR扩增;四、人造细胞分裂。本发明制备出结构完整,大小均一,其中的小泡囊尺寸与人体细胞核尺寸相近的人造真核细胞,并且在人造的细胞核中成功的进行了PCR技术和人造细胞的分裂过程,实现了人造细胞核的功能化。本发明用于制备真核细胞模型。 | ||
搜索关键词: | 制备 真核细胞 细胞核 人造细胞 细胞模型 人体细胞核 分裂过程 磷脂泡囊 原核细胞 功能化 人造的 单室 均一 小泡 进化 分裂 成功 研究 | ||
【主权项】:
1.一种真核细胞模型的制备方法,其特征在于该方法是按照以下步骤进行的:一、制备单室磷脂泡囊:将二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱和胆固醇加入到氯仿中,得到磷脂溶液,将两片ITO玻璃电极表面分别涂覆5~7μL的磷脂溶液,待氯仿蒸干,得到两片表面覆有磷脂溶液的ITO玻璃电极;将聚四氟乙烯矩形框置于两片表面覆有磷脂溶液的ITO玻璃电极中间,得到电形成装置,利用真空脂将电形成装置密封,且聚四氟乙烯矩形框与两片表面覆有磷脂溶液的ITO玻璃电极形成中间空腔,中间空腔内填充PCR缓冲溶液,在两片表面覆有磷脂溶液的ITO玻璃电极上分别连接信号发生器,设定交流电压为3~5V,波形为正弦波,设定频率为10~12Hz,时间控制为1~4h,得到单室磷脂泡囊;二、制备人造真核细胞模型:将PCR溶液与单室磷脂泡囊混合并静置30~35min,得到人造真核细胞溶液;三、PCR扩增:将含有遗传物质的人造真核细胞溶液放置到PCR仪中,进行PCR扩增;四、人造细胞分裂:将PCR扩增产物与190mM的PCR缓冲溶液混合,最终得到真核细胞模型;步骤一和步骤四中PCR缓冲溶液由200mM Tris‑HCl、200mM KCl、100mM(NH4)2SO4和20mM MgSO4组成;步骤二中所述PCR溶液的具体成分如下:
其中PCR缓冲溶液由200mM Tris‑HCl、200mM KCl、100mM(NH4)2SO4和20mM MgSO4组成。
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