[发明专利]一种基于疏水性电荷诱导磁性微球的抗体荧光标记方法

摘要

本发明公开了一种基于疏水性电荷诱导磁性微球的抗体荧光标记新方法。具体步骤如下1)取适量待标记的抗体溶于孵育缓冲液，并加入疏水性电荷诱导磁性微球进行抗体的吸附。2)在外加磁场辅助下，用孵育缓冲液洗去未吸附的抗体，计算抗体的吸附量。3)根据抗体的吸附量，加入适量的异硫氰酸荧光素，将异硫氰酸荧光素与上述微球振荡混合，进行标记。4)标记完成后，在外加磁场的辅助下洗涤除去未反应的异硫氰酸荧光素，调节溶液pH至酸性解吸同收已标记的抗体。本发明所开发方法的特色在于设计了一种高效的抗体荧光标记的新方法。

主权项

一种基于疏水性电荷诱导微球的抗体荧光标记方法，其特征在于包括如下步骤：1)取适量待标记的抗体溶于由生理盐水和0.5M pH 7‑9的碳酸钠缓冲液按照体积比9∶1构成的孵育缓冲液中，与具有疏水性电荷诱导效应的磁性微球振荡混合，4℃下，孵育0.5‑8小时；2)测定吸附前后溶液中抗体的浓度，计算抗体吸附量，在外加磁场辅助下，用孵育缓冲液洗涤3次，洗去未吸附的抗体以及其他杂质；3)根据计算的抗体吸附量，按照每毫克抗体加入0.01‑20mg的异硫氰酸荧光素，将异硫氰酸荧光素缓慢添加至装有磁性微球的三角瓶中，4℃下振荡混合1‑8小时，进行荧光标记；4)标记完成后，在外加磁场的辅助下，用孵育缓冲液洗涤3次，除去游离的异硫氰酸荧光素；5)采用1M醋酸溶液调节溶液pH至4.0‑5.5，4℃下振荡混合5‑30分钟，回收标记抗体。