[发明专利]一种基于疏水性电荷诱导磁性微球的抗体荧光标记方法

权利要求书

1.一种基于疏水性电荷诱导微球的抗体荧光标记新方法，其特征在于包括如下步骤：

1)取适量待标记的抗体溶于由生理盐水和0.5MpH7-9的碳酸钠缓冲液(9∶1)构成的孵育缓冲液中，与具有疏水性电荷诱导效应的磁性微球振荡混合，4℃下，孵育0.5-8小时；

2)测定吸附前后溶液中抗体的浓度，计算抗体吸附量，在外加磁场辅助下，用孵育缓冲液洗涤3次，洗去未吸附的抗体以及其他杂质；

3)根据计算的抗体吸附量，按照每毫克抗体加入0.01-20mg的异硫氰酸荧光素，将异硫氰酸荧光素缓慢添加至装有磁性微球的三角瓶中，4℃下振荡混合1-8小时，进行荧光标记；

4)标记完成后，在外加磁场的辅助下，用孵育缓冲液洗涤3次，除去游离的异硫氰酸荧光素；

5)采用1M醋酸溶液调节溶液pH至4.0-5.5，4℃下振荡混合5-30分钟，回收标记抗体。

2.根据权利要求1所述的一种基于疏水性电荷诱导微球的抗体荧光标记新方法，其特征在于所述的具有疏水性电荷诱导效应的磁性微球为偶联有4-巯乙基吡啶或氨基咪唑的磁性琼脂糖微球。

3.根据权利要求1所述的一种基于疏水性电荷诱导微球的抗体荧光标记新方法，其特征在于所述的孵育缓冲液为生理盐水和0.5MpH7-9的碳酸钠缓冲液按照质量比9∶1的比例混合的缓冲液。

4.根据权利要求1所述的一种基于疏水性电荷诱导微球的抗体荧光标记新方法，其特征在于所述的洗脱pH值为4.0-5.5。