[发明专利]多糖多酚植物基因组的提取方法有效
| 申请号： | 201510829928.5 | 申请日： | 2015-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN105368815B | 公开（公告）日： | 2018-09-11 |
| 发明（设计）人： | 孙子奎;王锋;丁方美;李嫦娥;刘艳艳 | 申请（专利权）人： | 上海派森诺生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海晨皓知识产权代理事务所(普通合伙) 31260 | 代理人： | 成丽杰 |
| 地址： | 200231 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于分子生物学技术领域，公开了一种多糖多酚植物基因组的提取方法，步骤为：取植物材料研磨后加入核酸分离缓冲液和2‑巯基乙醇，混匀后置水浴中；离心机中离心后弃上清；加入1×PBS溶液，研磨仪上震荡混匀，离心后弃上清；向沉淀中加入预热的3×CTAB裂解液并混匀，水浴裂解；加等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；取上清，加入等体积氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；取上清，加入NaCl和冰异丙醇，混匀，沉淀1～3小时；取出离心后，将沉淀用乙醇洗涤，风干后加TE溶解，即完成提取。本发明能有效去除多糖多酚，减少糖和酚类物质对核酸提取的影响，提高DNA的质量和浓度。 | ||
| 搜索关键词： | 多糖 植物 基因组 提取 方法 | ||
【主权项】：
1.一种多糖多酚植物基因组的提取方法，其特征在于，包含下述步骤：(1)取待提取植物材料，研磨后加入核酸分离缓冲液和2‑巯基乙醇，并使所述2‑巯基乙醇的终浓度为1％～5％，震荡混匀后，置于75～95度水浴中5～30分钟；(2)从水浴中取出，离心机中离心，弃掉上清液；(3)加入1×PBS溶液，研磨仪上震荡混匀，离心，弃上清；(4)向沉淀中加入500～1000ul预热的3×CTAB裂解液并混匀，65度水浴裂解30～60分钟；(5)加等体积的酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；(6)取上清，加入等体积的氯仿/异戊醇混合液，混匀，离心；(7)取上清，加入NaCl和冰异丙醇，上下颠倒混匀，在‑20～‑80度环境下沉淀1～3小时；(8)取出，离心后，将沉淀用乙醇洗涤，风干后加TE溶解，即得到所提取的基因组。
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