[发明专利]一种基于光纤免疫传感检测邻苯二甲酸酯类化合物浓度的方法

摘要

本发明公开了一种基于光纤免疫传感检测邻苯二甲酸酯类化合物浓度的方法，1）构建光纤免疫传感检测系统；2）标准抑制曲线的建立；2.1）将荧光标记抗体溶液与已知浓度的邻苯二甲酸酯类化合物标准溶液混合，预反应后输入光纤免疫传感检测系统，得到响应信号；2.2）改变邻苯二甲酸酯类化合物浓度，重复步骤2.1），得到不同浓度下的响应信号；2.3）根据浓度对数值和抑制率绘制标准抑制曲线；3.1）将待测邻苯二甲酸酯类化合物重复步骤2.1），得到响应信号和抑制率；3.2）根据标准抑制曲线，即可获得待测邻苯二甲酸酯类化合物的浓度。本方法可以同时检测多种PAEs，且具有较高的灵敏度和精密度，检测快速。

主权项

一种基于光纤免疫传感检测邻苯二甲酸酯类化合物浓度的方法，其特征在于：步骤如下，1）光纤免疫传感检测系统的构建；光纤免疫传感检测系统包括激光发射装置、用于光路传递的非对称光纤耦合器、光纤探头、样品池、荧光滤光片、光电二极管、锁相放大器和计算机，非对称光纤耦合器由单模光纤和多模光纤构成；非对称光纤耦合器的多模光纤一端通过光纤连接器接光纤探头，多模光纤另一端朝向荧光滤光片；光纤探头置于样品池中，光纤探头表面附着有包被原；2）光纤免疫传感检测标准抑制曲线的建立；2.1）将600 μL浓度为0.5 μg·mL^‑1的荧光标记抗体溶液与600 μL某已知浓度的邻苯二甲酸酯类化合物标准溶液混合，其中抗体为可与多种邻苯二甲酸酯类化合物特异性结合的广谱性抗体，预反应5 min；再用蠕动泵将该混合液以0.3 mL·min^‑1的速度输入到样品池，持续2 min，继续反应6 min，使得光纤探头表面抗原与荧光标记抗体结合；启动激光发射装置，发出的激光依次通过非对称光纤耦合器的单模光纤和多模光纤、光纤连接器，进入光纤探头，在光纤探头表面产生倏逝波，倏逝波激发探头表面的荧光物质产生荧光；部分荧光耦合回光纤探头，经光纤连接器进入非对称光纤耦合器的多模光纤，并从多模光纤的另一端射出；射出的荧光经荧光滤光片滤除反射的激发光后，绝大部分荧光透过，透过的荧光经雪崩光电二极管探测并将光信号转换为电信号，电信号经锁相放大器放大后，由计算机采集并进行数据处理，从而得到与已知浓度的该邻苯二甲酸酯类化合物对应的响应信号；2.2）改变邻苯二甲酸酯类化合物浓度，重复步骤2.1），得到不同已知浓度下的该邻苯二甲酸酯类化合物对应的响应信号；2.3）以该邻苯二甲酸酯类化合物的浓度对数值为横坐标，抑制率为纵坐标，绘制标准抑制曲线；抑制率指该邻苯二甲酸酯类化合物抑制时的响应信号值与无抑制时的响应信号值之比；无抑制时的响应信号值即步骤2.1）中邻苯二甲酸酯类化合物的浓度为0时的响应信号值；3）待测邻苯二甲酸酯类化合物浓度的检测；3.1）将已知浓度的邻苯二甲酸酯类化合物替换为待测邻苯二甲酸酯类化合物，然后重复步骤2.1），得到待测邻苯二甲酸酯类化合物对应的响应信号，计算获得抑制率；3.2）根据光纤免疫传感检测标准抑制曲线上横坐标和纵坐标的对应关系，找到与待测邻苯二甲酸酯类化合物抑制率对应的浓度对数值，即可获得待测邻苯二甲酸酯类化合物的浓度。