[发明专利]D-丙氨酸缺陷型筛选表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法在审
| 申请号： | 201510779911.3 | 申请日： | 2015-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN105368767A | 公开（公告）日： | 2016-03-02 |
| 发明（设计）人： | 沐万孟;江波;陈秋铭;张涛 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/75;C12P19/24;C12R1/125 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 时旭丹;张仕婷 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨湖区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 基于D-丙氨酸缺陷型筛选标记的表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法和应用，属于酶的基因工程技术领域。本发明以枯草芽孢杆菌1A751为出发菌株，敲除其染色体上D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到D-丙氨酸缺陷型的枯草芽孢杆菌1A751(dal-)；将来源于一种嗜热厌氧杆菌的纤维二糖-2-差向异构酶（CE酶）基因作亲本，在其上游融合P43启动子构建成P43-TsCE，将P43-TsCE构建至质粒pUB110中得pUB-P43-TsCE，将质粒pUB-P43-TsCE上的抗生素抗性基因卡那霉素和博来霉素用(dal)替代，构建成pUB-P43-TsCE-dal；将pUB-P43-TsCE-dal转化进宿主1A751(dal-)中，得一株表达纤维二糖-2-差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌，其保藏编号CCTCC NO：M 2015582。发酵液总酶活达7U/mL，具有重要的工业应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 丙氨酸 缺陷 筛选 表达 纤维 差向异构 重组 枯草 芽孢 杆菌 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一株基于D‑丙氨酸缺陷型筛选标记的表达纤维二糖‑2‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌，其分类命名为枯草芽孢杆菌SK40.001(Bacillus subtilis) SK40.001，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2015582。
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