[发明专利]兔出血症病毒双抗夹心ELISA检测试剂盒及使用方法在审
| 申请号： | 201510703451.6 | 申请日： | 2015-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN105277696A | 公开（公告）日： | 2016-01-27 |
| 发明（设计）人： | 刘光清;郭慧敏;李传峰;陈宗艳 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/577 |
| 代理公司： | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人： | 郭国中 |
| 地址： | 200241 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供一种兔出血症病毒双抗夹心ELISA检测试剂盒及使用方法，所述试剂盒及方法是基于单克隆抗体9H9实现的，所述9H9通过如下方法筛选得到：免疫原制备、阳性杂交瘤细胞建株、腹水制备与纯化即得7株单克隆抗体4A5，5B7，6F6，9H9，11D4，15C3，16F2；对所述7株单克隆抗体进行包被抗体与酶标抗体配对，即得适用于检测兔出血症病毒的双抗夹心ELISA方法的包被抗体9H9、酶标抗体HRP-9H9。用本发明技术方案进行检测无交叉反应；操作简便、敏感性高、可避免因体内抗体滴度低而出现漏检现象；特异性高，适于大规模检测。 | ||
| 搜索关键词： | 出血 病毒 夹心 elisa 检测 试剂盒 使用方法 | ||
【主权项】：
一种适用于检测兔出血症病毒的双抗夹心ELISA方法的单克隆抗体9H9，其特征在于，通过如下方法筛选得到：免疫原制备：纯化的VP60蛋白与弗氏完全佐剂、弗氏不完全佐剂，制备免疫原，免疫小鼠；阳性杂交瘤细胞制备：取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，间接ELISA筛选得阳性杂交瘤细胞；单克隆抗体：阳性杂交瘤细胞亚克隆建株，腹水制备、纯化，即得7株单克隆抗体4A5，5B7，6F6，9H9，11D4，15C3，16F2；对所述7株单克隆抗体进行HRP标记；夹心抗体配对：对所述7株单克隆抗体进行包被抗体与酶标抗体配对，即得适用于检测兔出血症病毒的双抗夹心ELISA方法的包被抗体9H9、酶标抗体HRP‑9H9。
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