[发明专利]采用HPLC同时测定金银花及其植物中3种抗氧化活性成分含量的方法

摘要

本发明公开了采用HPLC同时测定金银花及其植物中3种抗氧化活性成分含量的方法；该方法取干燥的金银花或其植物叶茎0.5～2.0g，切细并搅碎后放置容器中，加乙醇，超声处理，得测试样溶液；取测试样溶液，上ODS色谱柱，梯度洗脱：洗脱液为乙腈与磷酸水的混合液；流动相中乙腈的浓度梯度随时刻的变化：检测波长在初始时刻t₀至时刻t₅期间采用320～340nm，然后转换波长为345～365nm进行检测；t₅＝10～18min；依次测定，计算出金银花中3种有效成分绿原酸、木犀草素和木犀草苷的含量。本发明提供一种灵敏度和精确度高，工作流程简便的采用HPLC同时测定金银花及其植物中3种抗氧化活性成分含量的方法。

主权项

采用HPLC同时测定金银花及其植物中3种抗氧化活性成分含量的方法，其特征在于包括如下步骤：1)测试样溶液的配制：取干燥的金银花或其植物叶茎0.5～2.0g，切细并搅碎后放置容器中，加质量浓度为50～80％乙醇5～20ml，超声处理，过0.45μm的滤膜，添加乙醇定容，得测试样溶液；2)测定金银花中3种有效成分绿原酸、木犀草素和木犀草苷的含量：取步骤1)的测试样溶液，上ODS色谱柱，梯度洗脱：洗脱液为乙腈与磷酸水的混合液，乙腈在所述混合液中的质量浓度为0.1～1.0％；流动相中乙腈的浓度梯度随时刻的变化情况如下：(1)第一梯度，从起始时刻0min至时刻t₁，质量百分比计，乙腈由初始的C_A0上升到C_A1；t₁＝5～13min；C_A0＝0.1～10％；C_A1＝13～18％；(2)第二梯度，从起始时刻t₁至时刻t₂，乙腈A由C_A1上升到C_A2；t₂＝15～22min；C_A2＝20～26％；(3)第三梯度，从时刻t₂至时刻t₃，乙腈A由C_A2上升到C_A3；t₃＝23～30min；C_A3＝28～35％；(4)第四梯度，从t₃至时刻t₄，乙腈A由C_A3下降至C_A0；t₄＝35～45min；控制洗脱液流速为0.5～1.0mL/min，柱温为20～40℃，检测波长在初始时刻t₀至时刻t₅期间采用320～340nm，然后转换波长为345～365nm进行检测；t₅＝10～18min；依次测定，计算出金银花中3种有效成分绿原酸、木犀草素和木犀草苷的含量。