[发明专利]一种乳糖酸修饰的超小型超顺磁四氧化三铁纳米颗粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种乳糖酸修饰的超小型超顺磁四氧化三铁纳米颗粒的制备方法，包括：将三价铁盐与亚硫酸钠反应后加入超支化聚乙烯亚胺和氨水，反应后加入FI，得Fe₃O₄/PEI.NH₂-FI；LA经EDS和NHS活化，加到COOH-PEG-NH₂的溶液中，反应得COOH-PEG-LA；COOH-PEG-LA经EDC和NHS活化，加到Fe₃O₄/PEI.NH₂-FI中，反应后经乙酰化即得。本发明的方法简单，反应条件温和，易于操作；制备的纳米颗粒粒径较小、弛豫率很高，并且具有良好的胶体稳定性、生物相容性和特定的去唾液酸糖蛋白受体高表达肿瘤细胞的靶向性，在体内肿瘤靶向MR成像诊断领域具有潜在的应用价值。

主权项

一种乳糖酸修饰的超小型超顺磁四氧化三铁纳米颗粒的制备方法，包括：(1)将三价铁盐溶于超纯水中，氮气鼓吹，加入亚硫酸钠溶液，反应30～40分钟，依次加入超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液和NH₃·H₂O，60～70℃下恒温搅拌反应30～40分钟；然后在室温下反应1.5～3小时，将产物磁分离，洗涤，得到PEI包裹的超小型超顺磁四氧化三铁纳米颗粒Fe₃O₄/PEI.NH₂；其中，三价铁盐、亚硫酸钠和PEI的质量比为1.2～1.4：0.20～0.25：0.50～0.53；三价铁盐、超纯水和NH₃·H₂O的配比为1.2～1.4g：20～25mL：2～3mL；(2)将步骤(1)中的Fe₃O₄/PEI.NH₂洗涤，分散于溶剂中，然后加入FI溶液，搅拌，磁分离，洗涤，分散于水中，得到Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI纳米颗粒水溶液；其中，Fe₃O₄/PEI.NH₂中的PEI和FI的摩尔比是1：10～15；(3)将LA与EDS和NHS混合溶于磷酸盐缓冲溶液PBS中，搅拌活化，加入到COOH‑PEG‑NH₂的PBS溶液中，搅拌2～4天，透析，真空冷冻干燥，得到COOH‑PEG‑LA；其中，LA与COOH‑PEG‑NH₂的摩尔比是1～1.5：1；(4)将步骤(3)中的COOH‑PEG‑LA与EDC和NHS混合溶于水中，搅拌活化，然后加入到步骤(2)中的得到Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI纳米颗粒水溶液中，搅拌2～4天，磁分离，洗涤，分散于水中，得到Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI‑PEG‑LA纳米颗粒水溶液；其中，COOH‑PEG‑LA和Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI中PEI的摩尔比是15～20：1；(5)将三乙胺加入到步骤(4)中Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI‑PEG‑LA纳米颗粒水溶液中，搅拌20～40分钟，然后加入乙酸酐，搅拌20～30小时，磁分离，洗涤，得到Fe₃O₄/PEI.NHAc‑FI‑PEG‑LA纳米颗粒；其中，三乙胺、乙酸酐和Fe₃O₄/PEI.NH₂‑FI‑PEG‑LA上PEI伯胺的摩尔比是5～10：5～10：1。