[发明专利]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N315F及其应用有效
| 申请号： | 201510560069.4 | 申请日： | 2015-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN105062981B | 公开（公告）日： | 2018-02-23 |
| 发明（设计）人： | 徐国强;蒋伶活;吴满珍;李鹏越 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/00 | 分类号： | C12N9/00;C12N1/19;C12P7/46;C12P7/44;C12N15/52 |
| 代理公司： | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙)11419 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体N315及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的N315位点突变成了苯丙氨酸，得到的突变体酶活提高了18.6％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量表达丙酮酸羧化酶突变体N315F，发现延胡索酸产量提高了22.0％。同时通过减少装液量，增加溶氧，延胡索酸产量达到318±11.2mg/L，较装液量为100mL/250mL时(253±9.0mg/L)提高了25.7％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 活性 提高 丙酮酸 羧化酶 突变体 n315f 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种丙酮酸羧化酶突变体，其特征在于，所述突变体是在氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的米根霉丙酮酸羧化酶的基础上，将第315位的天冬酰胺突变成为苯丙氨酸。
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