[发明专利]白芨多糖水凝胶、培养基质及其应用与诱导脐带间充质干细胞向角膜上皮细胞分化的方法

摘要

本发明涉及细胞培养领域，尤其涉及白芨多糖水凝胶、培养基质及其应用与诱导脐带间充质干细胞向角膜上皮细胞分化的方法。本发明将白芨多糖经硫酸化后与携带多官能团的ε‑聚赖氨酸交联制得多糖水凝胶。该白芨多糖水凝胶呈半透明膜状，其中具有良好的孔隙，适宜细胞的生长与分化。实验表明，以本发明提供的白芨多糖水凝胶为支架，将hUC‑MSCs与羊膜上皮细胞共培养7天后，hUC‑MSCs的分化率可达31.96％。该分化率显著(p<0.01)未采用凝胶支架的对比例。并且，本发明提供的凝胶还能够使细胞生长旺盛，缩短诱导时间。

主权项

白芨多糖水凝胶的制备方法，其特征在于，由白芨多糖经硫酸化后以ε‑聚赖氨酸交联制得白芨多糖水凝胶；所述白芨多糖的分子量为30000D～50000D；所述硫酸化为：将白芨多糖溶于无水N,N‑二甲基甲酰胺，室温搅拌30min后，加入硫酸化试剂，置于60℃水浴搅拌反应3h；所述硫酸化试剂由体积比为1:6的氯磺酸与吡啶组成；所述交联为，将硫酸化的白芨多糖溶液与ε‑聚赖氨酸溶液混合后静置；所述交联的温度为18℃～35℃，时间为20s～40s；所述ε‑聚赖氨酸溶液的溶剂为PBS缓冲液，其中，ε‑聚赖氨酸的质量分数为3％；所述硫酸化的白芨多糖溶液的溶剂为PBS缓冲液，其中，硫酸化白芨多糖的浓度为200μg/mL。