[发明专利]一种单分子靶向测序中靶向引物的固定方法、单分子靶向测序试剂盒及应用有效
| 申请号： | 201510501968.7 | 申请日： | 2015-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN105112408B | 公开（公告）日： | 2019-05-07 |
| 发明（设计）人： | 葛良进;高雁;纪道锐;邓力蔚;吴增丁;蔡金森 | 申请（专利权）人： | 深圳市瀚海基因生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人： | 郝传鑫;熊永强 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区西丽街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种单分子靶向测序中靶向引物的固定方法、单分子靶向测序试剂盒及应用。所述方法包括：(1)将一基底浸泡在含0.4～3.2nM靶向引物的固定液中，之后清洗基底，其中，所述靶向引物为5’端具有10～30bp的polyT的引物序列，所述引物序列为与模板核酸的至少部分序列互补的序列；(2)将清洗后的基底浸入磷酸盐钝化液中进行钝化；之后再清洗基底，获得所述表面固定有靶向引物的基底。本发明提供的靶向引物的固定方法操作简单，对靶向引物的固定密度均匀，固定密度约为3000点/视野。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分子 靶向 测序中 引物 固定 方法 试剂盒 应用 | ||
【主权项】：
1.一种单分子靶向测序中靶向引物的固定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将一基底浸泡在含0.8～1.6nM靶向引物的固定液中，之后清洗基底，其中，所述靶向引物为5’端修饰有氨基的顺次连接有10‑20bp的polyT，以及与模板核酸的至少部分序列互补的序列；所述固定液为0.02～0.3M的K2HPO4溶液；所述基底表面修饰有环氧基；在所述浸泡过程中，所述靶向引物通过5’端修饰的氨基连接到表面修饰有环氧基的基底；(2)将清洗后的基底浸入钝化液为0.2～1.0M的K2HPO4溶液中进行钝化；之后再清洗基底，获得表面固定有靶向引物的基底。
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