[发明专利]一种抑制鸡细胞周期蛋白F基因表达的shRNA分子序列及其应用有效
申请号: | 201510477667.5 | 申请日: | 2015-08-06 |
公开(公告)号: | CN105039343B | 公开(公告)日: | 2018-09-04 |
发明(设计)人: | 孙研研;陈继兰;富丽;薛夫光 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/867;A01K67/027 |
代理公司: | 北京风雅颂专利代理有限公司 11403 | 代理人: | 王安娜;李翔 |
地址: | 北京市海淀区圆明园西路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及针对鸡细胞周期蛋白F基因,构建抑制该基因表达效率最佳的shRNA慢病毒干扰载体。针对鸡细胞周期蛋白F基因设计的4个shRNA寡核苷酸序列,克隆到慢病毒干扰载体lentiviral vector中,构建出四个干扰载体,与包装质粒共转染293T细胞,上清培养液过滤后到病毒悬液,测定病毒滴度后以一定MOI病毒量感染鸡胚成纤维细胞系和鸡胚睾丸支持细胞,筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体。在分子生物学上通过实时荧光定量PCR证明它有效的降低了鸡细胞周期蛋白F基因的表达。 | ||
搜索关键词: | 一种 抑制 细胞周期 蛋白 基因 表达 shrna 分子 序列 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种作用于鸡细胞周期蛋白F基因的shRNA分子序列,所述shRNA分子序列的单链寡核苷酸序列为GCAGAAGTGAATGGATTAAAGTTCAAGAGACTTTAATCCATTCACTTCTGCTT。
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