[发明专利]一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法有效
| 申请号: | 201510458766.9 | 申请日: | 2015-07-30 |
| 公开(公告)号: | CN105181963B | 公开(公告)日: | 2017-08-01 |
| 发明(设计)人: | 陈德坤;霍宁宁;刘鹤媛;周铭 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
| 代理公司: | 西安新思维专利商标事务所有限公司61114 | 代理人: | 韩翎 |
| 地址: | 712100 陕西省西安市杨*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | 本发明涉及生物技术领域,提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法,检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体,判断山羊是否感染伪结核。本发明确定了阴阳性临界值,具有很高的特异性和重复性,能够快速有效的检测出山羊血清中的伪结核抗体,可用于山羊伪结核诊断、流行病学调查。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 山羊 结核杆菌 抗体 elisa 检测 试剂盒 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法,其特征在于:所述的制备方法为:用伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原,确定抗原包被浓度,待检血清稀释度,并界定阴阳血清的临界值,建立并组装间接ELISA检测试剂盒;包被抗原的制备:将伪结核棒状杆菌单菌落接种于5mL LB培养液中,在200~220rpm,37℃的条件下扩大培养48h后,10000~12000rpm离心3~5min,收集菌体,用PBS洗涤菌体三次,用碳酸盐缓冲液重悬菌体,制成菌悬液,此即为包被抗原;配制不同浓度的包被抗原,确定包被抗原浓度对应的OD600值在0.060~0.090之间。
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