[发明专利]一种固相介质选择性提取短片段长度DNA的方法

摘要

本发明的一种固相介质选择性提取短片段长度DNA的方法，将利用硅烷偶联试剂在表面同时修饰氨基和羧基的固相介质和不同片段长度的DNA分子混合。通过对固相介质进行表面修饰，使介质随着pH值的变化具备电荷反转特性，通过加入一定浓度的盐溶液使得不同片段DNA具有的电荷量不同，从而通过静电相互作用选择性吸附特定长度片段的DNA分子，达到高效提取，选择性提取的目的。本发明的优点在于：对DNA具有高的吸附效率和脱附效率,总提取效率高于95%，并且能够选择性分别提取不同片段长度的DNA分子，特别是小片段DNA分子，选择性分离效率高于90%，所用试剂简单经济,操作快速便捷。

主权项

 一种固相介质选择性提取短片段长度DNA的方法，包括如下步骤：将通过表面修饰后具有表面电荷反转能力的固相介质加入到含片段长度小于200 bp DNA的混合长度DNA溶液中，使溶液中固相介质的浓度为5 mg/ml；利用氯化钠调节体系Na⁺浓度至0.1~0.5 mol/L之间；调节混合溶液pH在3.0~5.5之间；将混合溶液摇床震荡30分钟后，采用离心分离的方式除去固相介质；向上清液中再加入固相介质，利用氯化钠调节体系Na⁺浓度至0.7~1.0 mol/L之间，将混合溶液摇床震荡30分钟，采用离心分离方式，将吸附了DNA的固相介质和溶液分离；将离心分离的固相介质加入水中，调节pH在10.0~11.0之间，摇床震荡30分钟，采用离心分离的方式除去固相介质，获得含片段长度小于200 bp的DNA溶液。