[发明专利]一种组织工程皮肤的制备方法

摘要

本发明涉及了一种组织工程皮肤的制备方法，本发明是在脱细胞猪胸主动脉血管内膜两侧分别种植成纤维细胞和表皮细胞构建而成的组织工程皮肤。与目前皮肤替代品相比较，原料来源丰富，可显著促进创面愈合并加速受创部位血管生成，减少瘢痕增生，机械性可满足机体要求，提高人工皮肤移植成功率。因此，本发明组织工程皮肤有应用于临床使用的巨大潜能。

主权项

1.一种组织工程皮肤的制备方法，其特征在于：是由脱细胞猪胸主动脉血管内膜、皮肤成纤维细胞和表皮细胞制成，是在脱细胞猪胸主动脉血管内膜两侧分别种植成纤维细胞和表皮细胞构建而成；所述的脱细胞猪胸主动脉血管内膜按以下方法制备：(1)取检疫合格月龄大于5个月的猪，无菌开腔，取胸主动脉，用医用生理盐水漂洗干净后，钝性分离制得厚度为0.3～0.5mm的血管内膜，再用医用生理盐水清洗，制得猪胸主动脉血管内膜；(2)将步骤(1)所得的猪胸主动脉血管内膜置于1M的氯化钠溶液中，并在37℃恒温摇床中以100～150r/min的转速震荡，每间隔6h以频率为40KHz的超声波震荡5min，24h后用医用生理盐水漂洗干净；(3)将步骤(2)得到的猪胸主动脉血管内膜置于浓度为10mg/mL的十二烷基硫酸钠溶液中，并在37℃恒温摇床中以100～150r/min的转速震荡，每间隔6h以频率为40KHz的超声波震荡5min，12～24h后用医用生理盐水漂洗干净；(4)将步骤(3)得到的猪胸主动脉血管内膜置于浓度为2.5mg/mL的胰酶溶液中，并在37℃恒温摇床中以100～150r/min的转速震荡，每间隔6h以频率为40KHz的超声波震荡5min，24～36h后用医用生理盐水漂洗干净，即得脱细胞猪胸主动脉血管内膜，贮存于75％乙醇中备用。