[发明专利]一种切梢小蠹伴生菌野外分离法

摘要

一种切梢小蠹伴生菌野外分离法，该方法先确定林内受害松树上切梢小蠹侵入孔，以侵入孔为起点沿切梢小蠹虫母坑道方向，剥去切梢小蠹虫母坑道表面树皮，露出切梢小蠹蛀食母坑道韧皮组织，若母坑道两侧已形成子坑道，则将其一并露出，检查确证切梢小蠹各蛀食坑道内是否存在切梢小蠹伴生菌孢子、菌丝、子囊壳以及蓝变韧皮组织，根据切梢小蠹伴生菌生长发育进度及蓝变韧皮组织情况，采取对应的切梢小蠹伴生菌分离措施。本发明将野外采样和实验室菌种分离合二为一，步骤简单，操作方便，切梢小蠹伴生菌分离获取成功率高，有效简化了过去通过先将受伴生菌感染木段或带坑道韧皮、蓝变组织带回实验室，再进行分离的诸多环节，节省伴生菌分离时间，精准分离并提高分离效率。

主权项

 一种切梢小蠹伴生菌野外分离法，其特征在于，该方法先确定林内受害松树上切梢小蠹侵入孔，以侵入孔为起点沿切梢小蠹虫母坑道方向，剥去切梢小蠹虫母坑道表面树皮，露出切梢小蠹蛀食母坑道韧皮组织，若母坑道两侧已形成子坑道，则将其一并露出，检查确证切梢小蠹各坑道内是否存在切梢小蠹伴生菌孢子、菌丝、子囊壳以及蓝变韧皮组织，根据切梢小蠹伴生菌生长发育进度及蓝变韧皮组织情况，采取对应的切梢小蠹伴生菌分离措施，具体的对应措施包括有：1）如果发现切梢小蠹蛀食坑道内黑色成熟子囊壳顶端着生白色或透明、半透明伴生菌孢子，即用灭菌细竹签挑取单个孢子在2% MEA上培养；2）如果坑道中仅发现深灰色菌丝或不成熟子囊壳，则切割下小薄段带有坑道的韧皮组织于加保湿棉层的自封袋中培养3~7天，待坑道内长出孢子再挑取到2% MEA培养基上；3）如果只发现蓝变的韧皮组织，则用75%酒精在韧皮部进行表面消毒后剥离外层蓝变组织，取小薄片内部蓝变组织插入2% MEA培养基培养。