[发明专利]一种基于中心切割技术鉴定复方感冒药中降解产物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法

摘要

本发明涉及一种运用二维中心切割技术鉴定复方感冒药中强制降解产物的高效液相色谱‑飞行时间质谱联用方法。其步骤为在第一维色谱中使用质谱不兼容流动相对样品进行分离；通过一维检测器采集紫外数据；确定目标峰，进行中心切割，使目标峰存于定量环中；二维体系使用质谱兼容性流动相，通过阀切换将目标峰反冲至二维体系中，进入二维紫外及质谱检测器中完成杂质分析和鉴定。本发明不改变原分离条件，对杂质检测具有较高的专属性、准确度以及分辨率，提高了非挥发性缓冲盐分离体系杂质质谱分析及鉴定的可靠性。

主权项

一种基于中心切割技术鉴定复方感冒药中布洛芬氧化样品的高效液相色谱‑四级杆飞行时间质谱联用方法，包括步骤：1)布洛芬氧化样品的制备：取相当于布洛芬200mg的复方感冒药适量，加乙腈10ml，超声使溶解，过滤，加30％过氧化氢10ml，置80℃水浴1小时，取出，放冷，转移至100ml量瓶中，定容，摇匀，滤过，待进样；2)一维高效液相色谱检测：将步骤1)制备的氧化破坏样品分别进样，在泵I的驱动下，样品通过第一维色谱柱进行分离，并通过检测器I，观察流出组分的特征，选定目标组分；一维色谱测定条件为：高效液相色谱：HPLC，Agilent 1260；色谱柱：Waters BEH C18 3.5μm 4.6*150mm；梯度洗脱条件：流动相A：体积比为83.5：16.5的0.02mol/L磷酸二氢钠和乙腈；其中磷酸二氢钠用磷酸调节pH至3.0；流动相B：体积比为16.5：83.5的0.02mol/L磷酸二氢钠和乙腈；其中磷酸二氢钠用磷酸调节pH至3.0；线性梯度：检测波长：214nm；流速：1.4ml/分钟；柱温：35℃；进样体积：20μl；3)捕集目标峰：通过阀切换，将一维色谱图中含目标组分的目标峰切出，捕集目标物至切换阀定量环中；4)二维高效液相色谱‑质谱检测：进行阀切换，在泵II的驱动下将定量环中的步骤3)捕集至定量环中的目标物通过二维质谱兼容性流动相反冲至二维色谱柱中，采用梯度洗脱方式进行脱盐，脱盐时流路通过检测器II进废液；经过脱盐后，再将流路从废液切换进质谱，采集目标物的紫外及质谱数据；5)质谱检测以ESI为离子源，电离模式为正离子模式以及选择Auto MS/MS功能同时获取目标物的一级以及二级高分辨质谱数据，进而借助仪器自带MSC软件进行结构推测和鉴定；其中所述步骤4)中二维高效液相色谱‑四级杆飞行时间质谱条件为：超高效液相色谱：UHPLC,Agilent 1290；色谱柱：Agilent ZORBAX Extend‑C18 1.8μm,2.1*50mm；流动相A:加入甲酸的水；B：加入甲酸的乙腈；流动相梯度：检测波长：215nm；流速：0.3ml/分钟；柱温：35℃；质谱仪：Q‑TOF G6540B Agilent；离子源：ESI+电离源；喷雾电压：3.5～4kV，雾化器流量：11L/min，去溶剂气温度：350℃，离子源气压：45psi，驱簇电压：120V，碰撞能量：35±15ev，MS扫描范围为100‑1000m/z，MS/MS扫描范围为50‑800m/z。