[发明专利]一种基于中心切割技术鉴定复方感冒药中降解产物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体地说，涉及鉴定复方感冒药中降解产物的方法。

背景技术

杂质研究与控制是药品质量控制的核心内容之一，药品在临床使用中产生的不良反应往往与产品中的杂质有关，因此杂质研究及控制是药品安全保证的关键要素，也是药品研发中风险控制意识的重要体现。通过药物的强制降解实验，利用液质技术对降解产物的结构进行解析，推测杂质的结构，并对可能的来源进行分析，为药物的杂质控制和工艺优化提供重要参考。

目前，液相色谱-质谱技术(liquid chromatography-mass spectrometry,LC/MS)因其卓越的灵敏度、高选择性和快速的特点已成为药品有关物质分析的首选技术。对于成分复杂的药物，使用LC/MS技术可以不经分离和纯化步骤即可获得样品的色谱和质谱信息。多级质谱和高分辨质谱技术的发展和应用，能够在线获得丰富的化合物片段信息和分子组成信息，为药物中有关物质的结构鉴定提供了快速、灵敏、准确的方法。

然而在各国药典中，有很多药品的有关物质检测项下使用的是离子对试剂、磷酸盐缓冲试剂等不挥发性的缓冲盐。虽然磷酸盐及离子对试剂会对杂质的保留以及峰形有很好的作用，但对化合物的鉴定带来了困难。LC/MS是杂质鉴定最常用的方法，如果流动相中使用了不挥发性的盐类，如磷酸盐、离子对试剂等，会极大降低质谱的灵敏度，污染质谱。所以，将这类流动相统称为质谱不兼容流动相。中心切割技术，可有效解决在使用质谱不兼容流动相时鉴定杂质的问题。即在一维体系中，使用质谱不兼容流动相对化合物进行分离，在二维体系中使用质谱兼容型流动相连接质谱检测器。通过软件控制阀切换，使一维体系中感兴趣的组分切入二维体系中，再进行杂质鉴定。

复方感冒药-布洛肾素那敏片(Advil Allergy and Congestion Relief Tablet)是由惠氏公司开发的新复方制剂，其含主药成分布洛芬、盐酸去氧肾上腺素以及马来酸氯苯那敏，2011年末首次在美国获批上市，暂未在国内上市销售。本品可迅速缓解普通感冒、上呼吸道过敏引起的相关症状。目前，对此复方制剂并没有公开的杂质检测方法，我们结合三个药物的性质及强制降解试验中杂质的分离情况，开发了适用于这三种药物杂质检测的液相分离分析方法。然而，此种方法中需要加入磷酸盐、三乙胺等质谱不兼容性缓冲盐从而保证获得较高的分离度以及保持较好的峰形，这对于杂质的定性检测则产生了极大的困难。

发明内容

本发明的目的是为了解决利用液质对杂质进行鉴定时使用非挥发性缓冲盐体系流动相对其造成的污染和干扰的难题，涉及一种基于二维中心切割技术鉴定复方感冒药中降解产物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种基于二维中心切割技术鉴定复方感冒药中降解产物的高效液相色谱-飞行时间质谱联用方法，包括步骤：

在第一维色谱中使用质谱不兼容流动相对样品进行分离；

通过一维检测器采集紫外数据，确定目标峰，进行中心切割，使目标峰存于定量环中；

二维体系使用质谱兼容性流动相，通过阀切换将目标峰反冲至二维体系中，进入二维紫外及质谱检测器中完成杂质分析和鉴定。

优选地，本发明方法包括下述具体步骤：

1)样品的制备：复方感冒药经过氧化破坏处理：

a.布洛芬氧化样品的制备：取复方感冒药适量(约相当于布洛芬200mg)，加乙腈10ml，超声使溶解，过滤，加30％过氧化氢10ml，置80℃水浴1小时，取出，放冷，转移至100ml量瓶中，定容，摇匀，滤过，待进样。

b.盐酸去氧肾上腺素及马来酸氯苯那敏氧化样品的制备：取复方感冒药适量(约相当于盐酸去氧肾上腺素10mg及马来酸氯苯那敏4mg)，加20％乙腈-水溶剂10ml，超声使溶解，摇匀加30％的过氧化氢5ml，置80℃水浴30分钟，取出，放冷，转移至25ml量瓶中，定容，摇匀，过滤，待进样。

2)一维高效液相色谱检测：将步骤1)制备的氧化破坏样品分别进样，在泵I的驱动下，样品通过第一维色谱柱进行分离，并通过检测器I，观察流出组分的特征，选定目标组分；

3)捕集目标峰：通过阀切换，将一维色谱图中目标峰切出，捕集至切换阀定量环中；