[发明专利]一种艰难梭状芽孢杆菌毒素基因的荧光PCR检测方法及其引物,以及试剂盒有效
申请号: | 201510303935.1 | 申请日: | 2015-06-04 |
公开(公告)号: | CN105039516B | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 聂玉强;李永强;杜艳雷 | 申请(专利权)人: | 广州市第一人民医院;广州维伯鑫生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/145 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 罗伟平;潘俊达 |
地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明属于基因检测技术领域,具体涉及一种艰难梭状芽孢杆菌毒素基因的荧光PCR检测方法及其引物,以及试剂盒,本发明的基因引物具有相应的特异性能好,长度合适,转录高效,不会形成二级结构,引物自身少于连续4个碱基的互补,采用本发明引物测试的符合率高达98.6%,测灵敏度可以达到100copies/mL。本发明检测方法,能够简单方便地提取出标本中的艰难梭菌DNA,如粪便标本,并对艰难梭状芽孢杆菌毒素A和艰难梭状芽孢杆菌毒素B基因进行检测,该方法使用特异性的扩增引物和荧光探针,使得检测的灵敏度和特异性得到很大程度的增强,从而避免了抗体及培养检测方法特异性不足,避免了误测的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 艰难 芽孢 杆菌 毒素 基因 荧光 pcr 检测 方法 及其 引物 以及 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种艰难梭状芽孢杆菌毒素基因的荧光PCR检测方法的引物,其特征在于:所述的艰难梭状芽孢杆菌毒素包括艰难梭状芽孢杆菌毒素A和艰难梭状芽孢杆菌毒素B,所述艰难梭状芽孢杆菌毒素A基因的荧光PCR检测方法的上游引物核苷酸序列SEQ ID NO.1,其下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.2,其荧光探针引物核苷酸序列SEQ ID NO.3;所述艰难梭状芽孢杆菌毒素B基因的荧光PCR检测方法的上游引物核苷酸序列SEQ ID NO.4,其下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.5,其荧光探针引物核苷酸序列SEQ ID NO.6。
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