[发明专利]一种利用树脂吸附发酵原液提取林可霉素的方法

摘要

本发明公开了一种利用树脂吸附发酵原液提取林可霉素的方法，其步骤如下(1)将发酵液放至预处理罐，边搅拌边加入氢氧化钠溶液，加热；加入树脂，缓慢搅拌，得到过滤好的树；(2)将过滤好的树脂加入等体积碱水中，加入去离子水清洗树脂；(3)将清洗好的树脂装入层析柱中，用正丁醇洗脱树脂；(4)取林可霉素解析液，加入活性炭脱色；(5)将脱色液通过脱盐柱脱盐，得林可霉素脱盐液；(6)浓缩；(7)干燥，获得盐酸林可霉素成品。本发明的方法避免了传统工艺中的板框压滤或者陶瓷膜过滤、溶媒萃取、反萃等工序，操作简单，劳动强度小，工作环境卫生，工艺精简，工艺占地少，成本低，环境污染小，总收率＞85％，成品纯度＞98％。

主权项

一种利用树脂吸附发酵原液提取盐酸林可霉素的方法，其步骤如下：(1)将发酵液放至预处理罐，一边搅拌，一边加入氢氧化钠溶液，将发酵液的pH调节至10～12；通入蒸汽，加热至55～75℃；按照吸附量为：40～60克林可霉素/升树脂，计算所需要的树脂体积；将称量好的树脂加入到发酵液中，缓慢搅拌2.5～3小时，树脂吸附完成后，用振荡筛或者抽滤缸除去发酵液及棉籽壳等杂质，得到过滤好的树脂；(2)将步骤(1)所得过滤好的树脂加入等体积pH8～14的碱水中，缓慢搅拌，加热至50～60℃，保温3小时，碱洗完成后，用振荡筛除去碱水；如此重复碱洗2～5次；然后，加入pH7.5～9.5去离子水，清洗树脂至pH值＜11，得到清洗好的树脂；(3)将步骤(2)中清洗好的树脂装入层析柱中，用1.5倍树脂体积‑3.0倍树脂体积正丁醇洗脱树脂，洗脱流速0.5倍树脂体积/小时‑2倍树脂体积/小时，将洗脱液按照每0.1～0.3倍树脂体积/桶分别收集，并分别进行HPLC检测分析；将各个洗脱液静置3小时，将每桶洗脱液的下层水相用分液装置分离掉，保留上层正丁醇相；最后合并效价≥20克/升的正丁醇相，得林可霉素解析液，剩余的林可霉素含量＜20克/升的正丁醇相合并，用于下次洗脱套用；(4)取步骤(3)所得林可霉素解析液，加入0.5～2.0％(W/V)活性炭，持续搅拌，加热至50～70℃，保温30分钟，然后过滤除去活性炭，得脱色液；(5)将步骤(4)所得脱色液以流速10倍树脂体积/小时～40倍树脂体积/小时通过脱盐柱脱盐，得林可霉素脱盐液；(6)将步骤(5)所得林可霉素脱盐液用浓盐酸调节pH值为1～3，40～50℃条件下，‑0.1～‑0.09MPa真空条件下浓缩至少量晶体析出，继续浓缩至溶液开始浑浊，0～20℃静置12小时；抽滤，得盐酸林可霉素晶体粗品；(7)在干燥温度为50～80℃，真空度为‑0.1～‑0.09Mpa条件下，干燥盐酸林可霉素晶体粗品，干燥时长为8～16小时，获得盐酸林可霉素成品。