[发明专利]一种异尖线虫虫体过敏原PCR检测技术在审
| 申请号： | 201510295385.3 | 申请日： | 2015-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN104946750A | 公开（公告）日： | 2015-09-30 |
| 发明（设计）人： | 李孝军;杨赛军;周圆;陈璐敏;单长林;沈飚 | 申请（专利权）人： | 舟山出入境检验检疫局综合技术服务中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 316000 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种异尖线虫虫体过敏原PCR检测技术，根据GenBank上公布的异尖科线虫线粒体COI序列设计特异性引物，对线虫样品进行PCR特异性扩增，结果表明，扩增的目的片段大小为178bp，该PCR检测体系的特异性强，不能在与鱼体中其他非异尖科线虫及鱼肉DNA中扩增出条带；敏感性高，最低检测的DNA含量为0.36pg。该检测体系的成功构建为简单异尖线虫的检测、鉴定和流行病学调查提供了有力的技术支持。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 线虫 虫体 过敏原 pcr 检测 技术 | ||
【主权项】：
一种异尖线虫虫体过敏原PCR检测技术，其特征在于，包括如下步骤：a)对异尖线虫DNA提取；b)引物设计：上游引物ANISAKIS COI F:5’—GGKCYATTAAYTYTATRACWACTAC—3’ (SEQ ID NO.1)下游引物ANISAKIS COI R5’—AAAGAWGTATTMARRTTACGRTCVG—3’ (SEQ ID NO.2)退火温度为54.5℃，预期扩增片段大小为178bp；c)对步骤b)的引物进行PCR扩增，琼脂糖凝胶上电泳，观察结果；d)分别进行特异性试验、敏感性试验进行验证。
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