[发明专利]一种水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针的制备方法

摘要

本发明公开的一种水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针的制备方法，主要步骤包括将四苯基乙烯荧光分子标记到壳聚糖链上得到具有AIE特性的TPE‑CS；采用醋酸/甲醇混合溶剂体系，对TPE‑CS进行琥珀酰化改性，从而制得TPE‑N‑CS。本发明制得的荧光探针具有很好的水溶性，且具有聚集诱导发光特性，与传统荧光探针相比，具有灵敏度高，光稳定性好，高浓度时无淬灭，荧光光谱不漂移等优点，成像效果佳。有望应用于细胞示踪、药物代谢检测、环境监测等领域。

主权项

一种水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1）称取1g粘均分子量为100万，脱乙酰度95%的壳聚糖加入到茄形瓶中，加入10mL DMSO，65℃下溶胀48h，然后向茄形瓶中加入含异硫氰酸酯官能团的四苯基乙烯衍生物TPEITC，TPEITC与壳聚糖中氨基的摩尔比的比值为20%，反应48h，获得溶液A并将其倒入250mL烧杯中；2）向溶液A中加入200mL无水乙醇，搅拌均匀后静置至溶液分层，去除上清液，离心后，将沉淀用40mL体积分数为2%的醋酸溶液溶解，过滤得到滤液；3）将四氢呋喃和去离子水以体积比1:1混合配置透析液，将滤液装入截留分子量为3500的透析袋中并置于透析液中透析7天，取出后用质量分数为5%的NaOH中和滤液，离心并水洗冻干，获得荧光标记壳聚糖TPE‑CS；4）称取0.5g TPE‑CS溶于50mL 2%醋酸溶液中，再加入100mL甲醇稀释，得到溶液B；称取 0.6795g丁二酸酐溶于10mL丙酮中，配置丁二酸酐的丙酮溶液，并将其滴入溶液B中，使丁二酸酐与荧光标记壳聚糖中氨基的摩尔比为3:1，搅拌反应3h，获得溶液C；将溶液C装入截留分子量为3500的透析袋中并置于去离子水中透析至中性，取出透析后的溶液C，冻干，获得水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针。