[发明专利]一种水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针的制备方法

权利要求书

1.一种水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）称取1g粘均分子量为100万，脱乙酰度95%的壳聚糖加入到茄形瓶中，加入10mL DMSO，65℃下溶胀48h，然后向茄形瓶中加入含异硫氰酸酯官能团的四苯基乙烯衍生物TPEITC，TPEITC与壳聚糖中氨基的摩尔比的比值为20%，反应48h，获得溶液A并将其倒入250mL烧杯中；

2）向溶液A中加入200mL无水乙醇，搅拌均匀后静置至溶液分层，去除上清液，离心后，将沉淀用40mL体积分数为2%的醋酸溶液溶解，过滤得到滤液；

3）将四氢呋喃和去离子水以体积比1:1混合配置透析液，将滤液装入截留分子量为3500的透析袋中并置于透析液中透析7天，取出后用质量分数为5%的NaOH中和滤液，离心并水洗冻干，获得荧光标记壳聚糖TPE-CS；

4）称取0.5g TPE-CS溶于50mL 2%醋酸溶液中，再加入100mL甲醇稀释，得到溶液B；称取 0.6795g丁二酸酐溶于10mL丙酮中，配置丁二酸酐的丙酮溶液，并将其滴入溶液B中，使丁二酸酐与荧光标记壳聚糖中氨基的摩尔比为3:1，搅拌反应3h，获得溶液C；将溶液C装入截留分子量为3500的透析袋中并置于去离子水中透析至中性，取出透析后的溶液C，冻干，获得水溶性壳聚糖基聚集诱导发光荧光探针。