[发明专利]一种提高生产多粘菌素菌株正向突变机率的方法有效
| 申请号： | 201510243805.3 | 申请日： | 2015-05-14 |
| 公开（公告）号： | CN106282024B | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 郑万静;闫彩洁 | 申请（专利权）人： | 河北圣雪大成制药有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/20;C12R1/12 |
| 代理公司： | 13125 石家庄君联专利代理事务所(特殊普通合伙) | 代理人： | 高宝新 |
| 地址： | 051430 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高挑选多粘菌素正向突变菌株机率的方法，涉及多粘芽抱杆菌筛选差异菌领域。本发明对分离平板培养基添加轻质碳酸钙，制备成平板后进行低温冷藏，在分离平板上进行菌株培养，依据单菌落出现的外观形态转接到添加有轻质碳酸钙的斜面培养基培养，将斜面培养基上培养完成后的菌苔接种于种子培养基中培养，即得正向突变率大于50％的菌株。本发明采用对粘杆菌素产生菌进行代谢调控和固体培养基初始湿度进行调节相结合的筛选方法，实现了高产菌落的直观可区分的筛选方法，提高了粘杆菌素筛选中获得正向突变菌株的机率，提高了筛选效率。本发明方法工艺简单、易操作。因而可进行大规模的筛选，获得较多的高产菌株，进而降低生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 生产 多粘菌素 菌株 正向 突变 机率 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提高挑选多粘菌素菌株正向突变机率的方法，其特征在于：对分离平板培养基添加轻质碳酸钙，制备成平板后进行低温冷藏，在分离平板上进行菌株培养，依据单菌落出现的外观形态转接到添加有轻质碳酸钙的斜面培养基培养，将斜面培养基上培养完成后的菌苔接种于种子培养基中培养，即得正向突变率大于50％的菌株；/n所述分离平板培养基由以下组份及重量百分比组成：葡萄糖0.5％-1.5％，酵母粉0.5％-1.5％，牛肉膏0.1％-0.5％，氯化钠0.1％-0.5％，轻质碳酸钙0.1-0.2％，琼脂2.2％，水余量；所述分离平板培养基pH6.0-7.2；/n所述单菌落分为N型菌落和G型菌落，所述N型菌落为粘稠型，所述G型菌落为干瘪型，所述G型菌落为高产菌落，直观的进行操作，挑选出正向突变菌株。/n
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