[发明专利]气相色谱-质谱法测定水生动物中19种氯代酚及其钠盐的方法

摘要

本发明公开了用气相色谱-质谱联用仪测定水生动物肌肉中19种氯代酚及其钠盐的方法，该方法选用硫酸溶液将样品消解，氯代酚游离，再通过二氯甲烷提取，稀NaOH溶液直一步提纯为钠盐，磷酸解钠，二氯甲烷-正己烷溶液再提纯，浓缩衍生后，用EI离子源轰击的气相色谱-质谱联用仪在相同条件下测定标准工作液系列和样品检测液，以样品检测液被测物与标准工作液被测物的保留时间和目标物的特征离子丰度相同或相近进行定性，用标准曲线内标法进行定量；该方法测定品检测液被测物准确性和精密度好，19种氯酚检出限在0.2μg/kg~1.0μg/kg之间，加标回收率符合污染物分析要求，在70%以上。

主权项

气相色谱‑质谱法测定水生动物中19种氯代酚及其钠盐的方法，其特征在于步骤如下：（1）待测水生动物样品切碎后均质，称取5.00 g置于样品管中，加入浓度为150 ng/mL的氘代2，4，6‑三溴苯酚100 μL，再加入质量百分浓度50%的硫酸溶液30 mL，在40℃恒温水浴摇床中摇荡6～12小时；（2）水浴后取出样品管，冷却至室温，加入10 mL二氯甲烷，摇荡后静置分层，将有机相吸入离心管，离心管中加入质量百分浓度4 % NaOH10 mL，摇荡后静置分层，弃去有机相，然后用磷酸溶液调节pH至6.2，再加入体积比1：1的二氯甲烷‑正己烷溶液10 mL，摇荡后静置分层，弃去水相；（3）有机相用饱和无水硫酸钠脱水后弃去水相，氮吹仪60 ℃下，将有机相浓缩至0.38～0.42mL，加入浓度为500 ng/ mL的氘代4‑氯‑3‑甲基酚10 μL，硅烷化衍生剂40 μL ，正己烷定容到0.5 mL，在40℃下衍生30 min，冷却至室温得到样品检测液，所述硅烷化衍生剂由N,O‑双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺与三甲基氯硅烷按体积比99：1配制；（4）用正己烷配制含有2‑氯酚、3‑氯酚、4‑氯酚、2,3‑二氯酚、2,4‑二氯酚、质量比1:1的2,5‑二氯酚+3,5‑二氯酚、2,6‑二氯酚、3,4‑二氯酚、2,4,6‑三氯酚、2,4,5‑三氯酚、2,3,4‑三氯酚、2,3,5‑三氯酚、2,3,6‑三氯酚、3,4,5‑三氯酚、2,3,5,6‑四氯酚、2,3,4,6‑四氯酚、2,3,4,5‑四氯酚和五氯酚的标准工作液0.5mL，标准工作液内含有氘代4‑氯‑3‑甲基酚5.00ng，氘代2，4，6‑三溴苯酚15.0ng，硅烷化衍生试剂40 μL，标准工作液内各氯代酚的含量都为1.0 ng或3.0 ng或5.0 ng或10.0 ng或15.0 ng或35 ng，标准工作液在40℃下衍生30 min，冷却至室温；（5）用气相色谱‑质谱联用仪测定样品检测液和标准工作液，测定条件都为EI离子源：230℃，DB‑5MS石英毛细管柱：60m×0.25mm×0.25μm，起始温度80℃，保持1min，传输线温度：250 ℃，电子能量：70eV，进样口温度：250 ℃，载气：氦气，纯度≥99.999 %，流速1.0 mL/min，进样量：2.0 μL，溶剂延迟：10.0 min，测定方式为离子监测方式，定性监测离子：一氯酚185、187、200，二氯酚93、219、234，三氯酚253、255、268，四氯酚287、289、304，五氯酚321、323、325、338，氘代4‑氯‑3‑甲基酚201、203、216，氘代2，4，6‑三溴苯酚389、391、406，定量离子：一氯酚185，二氯酚219，三氯酚253，四氯酚289，五氯酚323，氘代4‑氯‑3‑甲基酚201，氘代2，4，6‑三溴苯酚389；（6）以样品检测液被测物与标准工作液被测物的保留时间和目标物的特征离子丰度相同或相近进行定性，被测物色谱峰的保留时间和标准物相比，保留时间变化在±0.08min以内，被测物定性特征离子丰度与标准物相比，在色谱‑质谱允许误差内；以氘代4‑氯‑3‑甲基酚为一氯酚和二氯酚的内标物，以氘代2，4，6‑三溴苯酚为三氯酚、四氯酚和五氯酚的内标物，以标准工作液中被测物峰面积和内标物质峰面积的比值为纵坐标，标准工作液中被测物浓度为横坐标绘制标准曲线，内标法定量，由仪器工作站自动计算样品检测液被测物的含量。