[发明专利]一种载二氢杨梅素三元复合脂质体的制备方法

摘要

本发明提供了一种载二氢杨梅素三元复合脂质体的制备方法，包括以下步骤(1)制备阴离子脂质体；(2)制备阴‑阳离子二元复合脂质体混悬液；(3)制备载二氢杨梅素三元复合脂质体。本发明采用层层自组装技术制备载二氢杨梅素三元复合脂质体，主要利用带相反电荷的物质在液固界面通过静电作用交替沉积而形成多层超薄膜，并提出“阴离子脂质‑‑阳离子脂质‑‑羧甲基壳聚糖”这一全新多层自组装体系。组装完成的三元复合脂质体粒径为204.8±6.2nm，电位为‑8.1±2.5mV，具有明显的层状结构，在血浆中具有良好的稳定性，细胞毒性小于阳离子脂质体，同时具有pH敏感性，可在不同介质中选择性释放二氢杨梅素。

主权项

一种载二氢杨梅素三元复合脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备阴离子脂质体：将二氢杨梅素、阴离子脂质与辅助脂质按摩尔比2‑3:3‑4:3‑4的比例溶于氯仿，减压蒸发除去氯仿，得到干燥的脂质膜；加入HEPES缓冲液，缓缓震摇使脂质膜悬浮于HEPES缓冲液，得到阴离子脂质体混悬液；将阴离子脂质体混悬液进行水浴超声，水合后，挤压过膜，即得阴离子脂质体；(2)制备阴‑阳离子二元复合脂质体混悬液：将阳离子脂质、辅助脂质按摩尔比的比例1‑1.2：0.8‑1溶于氯仿，减压蒸发除去氯仿，得到均匀的薄膜，加入一定体积的HEPES缓冲液，缓缓震摇使脂质膜悬浮于HEPES缓冲液，得到阳离子脂质体混悬液；将阳离子脂质体混悬液与步骤(1)制备的阴离子脂质体，按阳离子脂质体：阴离子脂质体摩尔比2‑2.5:1‑1.5缓缓混合，水浴超声10min，得到阴‑阳离子二元复合脂质体混悬液；(3)制备载二氢杨梅素三元复合脂质体：随后向步骤(2)所得的阴‑阳离子二元复合脂质体混悬液中加入0.5％‑1％浓度的羧甲基壳聚糖水溶液，室温静置30min，即得载二氢杨梅素三元复合脂质体；其中，HEPES缓冲液的PH为7.4。