[发明专利]一种提高寡孢节丛孢捕食器官数量的方法

摘要

本发明涉及一种提高捕食线虫真菌寡孢节丛孢产生捕食器官的方法，属于应用微生物学领域。本发明通过在寡孢节丛孢孢子悬液中加入硝酸钠，寡孢节丛孢孢子悬液中至终浓度20mM，以此来提高寡孢节丛孢捕食器官数量和杀线虫能力。本发明的有益效果在于在寡孢节丛孢孢子悬液中加入NaNO3后，寡孢节丛孢产生大量捕食器官，杀线虫能力显著提高，在加入线虫12h时，线虫死亡率达到了85.88％；在加入线虫24h时，添加硝酸钠的比不添加的平板上产生的捕食器官数量多了5倍以上，线虫死亡率达到了99.80％。

主权项

一种提高寡孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)捕食器官数量的方法，其特征在于方法的步骤如下：a.制备实验用线虫在灭菌的燕麦水培养基上接种秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)，28℃培养7‑8天，用贝曼漏斗法过滤线虫，将收集的线虫2000rpm离心2min，弃上清，用无菌去离子水重悬，重复三次，最后将线虫稀释至15条/μL；b.制备孢子在250mL三角瓶中装入50mL CMA固体培养基，121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后接种寡孢节丛孢菌块，28℃培养15天，产生大量的孢子，将孢子用无菌水洗下，用六层无菌擦镜纸过滤收集；c.捕食器官诱导将硝酸钠加入寡孢节丛孢孢子悬液中至终浓度20mM，取150μL均匀涂布在CMA培养基上，28℃培养3‑4天，待菌丝长满平板，在平板上加入96‑100条线虫，分别于12h和24h在显微镜下观察计数捕器数量和线虫死亡率；同时，用未加硝酸钠的CMA培养基作为对照，每个实验三个重复，线虫死亡率按下式计算：线虫死亡率＝死亡线虫/添加线虫×100％。