[发明专利]一种无过敏原燕麦β-葡聚糖的制备方法

摘要

本发明提供的一种无过敏原燕麦β-葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：1）微波干燥；2）二氧化碳超临界萃取；3）淀粉酶酶解；4）糖化酶酶解；5）碱提取；6）等电点沉淀蛋白；7）离心分离收集上清液；8）蛋白酶酶解；9）絮凝沉淀；10）离心分离收集上清液；11）膜分离；12）真空浓缩；13）酒精沉淀；14）离心收集沉淀；15）真空干燥，该从燕麦麸提取燕麦β-葡聚糖的方法使无过敏源燕麦β-葡聚糖达到了高纯度、具有特定分子量的效果。

主权项

一种无过敏原燕麦β‑葡聚糖的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：1）微波干燥：将10～150目燕麦麸进行微波干燥，微波功率为：20～60kW、微波时间为：1～20min；2）二氧化碳超临界萃取：将步骤1）中的燕麦麸进行超临界二氧化碳萃取，去除燕麦麸中的油脂，萃取压力为：5～50MPa，萃取温度为：35～65℃，萃取时间为：0.5～5h，萃取流量为：2200～4300 L/h；3）淀粉酶酶解：将步骤2）中的燕麦麸按料液比1:5～1:35的比例加入去离子水，然后加入淀粉酶酶解，淀粉酶添加量为：0.1%～3.0%，酶解温度为：60～100℃，酶解时间为：0.1～3.0h，酶解pH为：4～8；4）糖化酶酶解：向步骤3）中的溶液中加入糖化酶进行酶解，淀粉酶添加量为：0.5%～5%，酶解温度为：50～85℃，酶解时间为：0.5～2.0h，酶解pH为：3.5～6.5；5）碱提取：将步骤4）中溶液的pH调整为：8～11，并在提取温度为：20～95℃，提取时间为：0.1～2.0h的条件下，提取燕麦β‑葡聚糖，提取次数为：1～3次；6）等电点沉淀蛋白：将步骤5）中溶液的pH调整为：3～6，并升温至80～100℃，加热0.5～4h，最后沉淀静置0.5～24h，分离上清液；7）离心分离收集上清液：将步骤6）中沉淀静置后的溶液采用离心机进行离心分离，并收集合并上清液；8）蛋白酶酶解: 向步骤7）中的上清液中加入蛋白酶进行酶解，蛋白酶添加量为：1.0%～8.0%，酶解温度为：40～80℃，时间为：1～5h，pH为：3～10；9）絮凝沉淀：向步骤8）中的溶液中先添加0.01%～2.0%壳聚糖后，再添加0.1%～5.0%的海藻酸钠，然后进行搅拌均匀，并静置1～15h，分离上清液，留下悬浮液；10）离心分离收集上清液：将步骤9）中的沉淀悬浮液采用离心机分离，收集上清液；11）膜分离：将步骤10）中的上清液用不同截留分子量的超滤膜采用串联膜分离的方式过滤分离，分段收集截留液，得到得到具有特定分子量的燕麦β ‑葡聚糖溶液；12）真空浓缩：将步骤11）中的燕麦β ‑葡聚糖溶液采用双效浓缩方式浓缩，得到具有特定分子量的燕麦β ‑葡聚糖浓缩液，浓缩温度为：40～70℃，真空度为：40～80Kpa，时间为1～10h，所得燕麦β ‑葡聚糖浓缩液浓度为20～40°Bé；13）酒精沉淀：将步骤12）中的燕麦β ‑葡聚糖浓缩液冷却至20～40℃，加入酒精至酒精浓度为60～90%，进行醇沉，静置2～12h，收集上清酒精液，进行酒精回收，剩余为沉淀悬浮液；14）离心收集沉淀：将步骤13）中的沉淀混悬液采用离心机离心收集沉淀；15）真空干燥：将步骤14）中的沉淀置于真空干燥箱中于温度50～80℃、真空度60～100KPa的条件下干燥2～8h，得到无过敏源燕麦β ‑葡聚糖。