[发明专利]一种稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3-氰基吡啶合成烟酰胺的方法

摘要

本发明涉及一种烟酸烟酰胺的合成方法。通过稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3-氰基吡啶催化合成烟酰胺，并考虑了金属离子的浓度对腈水合酶的酶活的影响。该方法产品纯度高，环境污染小，产物易于分离，有着很好的工业应用前景。

主权项

一种稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3‑氰基吡啶合成烟酰胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1) 种子培养：在三角瓶中装入,50‑70%的种子培养基，灭菌后接入4‑6%的菌种，在28‑32℃下，以80‑150rpm的速度搅拌震荡培养24‑50h，得到种子液，所述的菌种为黄色短杆菌；(2)发酵培养：向三角瓶中装入60%的发酵培养基，消毒后接入5‑8%的种子液，在通气量1:0.4‑0.6(V.V.M)；压力0.04‑0.1MPa，搅拌转速：100‑450rpm；温度：25‑35℃，发酵60‑75h后即可制得黄色短杆菌的细胞发酵液，然后离心分离所得沉淀细胞为催化3‑氰基吡啶合成烟酸的催化剂；所述的种子培养基的配方（g/L）：葡萄糖10‑20，酵母膏0.5‑3，NaCl 1‑2，K₂HPO₄0.1‑0.2，MgSO₄0.02‑0.04，尿素0.5‑0.7，调节pH =7.0‑8.0；所述的发酵培养基的配方（g/L）：甘油5‑7，酵母粉1‑3，尿素2‑4， K₂HPO₄0.5‑0.7，MgSO₄0.4‑0.7，La（（NO₃)₃1‑30ppm，调节pH =6.5‑7.5；（3）催化合成烟酸：将离心所得生物催化剂悬浮于去离子水中，并调节PH =6.5‑7.5，得到生物催化剂悬浮液，待用；  向反应釜中加入反应釜容量50‑60%的去离子水， 将一定量的底物3‑氰基吡啶和生物催化剂悬浮液加入到反应釜中，充分搅拌，调节pH到6.5‑7.5，在温度为26~34℃，进行生物催化反应，底物3‑氰基吡啶的起始添加量为80‑100g/L反应液，生物催化剂的起始添加量为18‑22g/L反应液；每隔0.8‑1.5小时对反应液中的3‑氰基吡啶浓度进行检测，当浓度低于0.5g/L后，同时补加底物和生物催化剂，二者的补加的量与起始量一致，连续补加7‑9次，反应45‑55h后，检测反应液中3‑氰基吡啶的浓度，当底物浓度趋向于零时即可终止反应，将反应液进行离心冷冻结晶，再真空干燥，即可得的烟酰胺成品。