[发明专利]一种稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3-氰基吡啶合成烟酰胺的方法

权利要求书

1.一种稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3-氰基吡啶合成烟酰胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1) 种子培养：

在三角瓶中装入,50-70%的种子培养基，灭菌后接入4-6%的菌种，在28-32℃下，以80-150rpm的速度搅拌震荡培养24-50h，得到种子液，所述的菌种为黄色短杆菌；

(2)发酵培养：向三角瓶中装入60%的发酵培养基，消毒后接入5-8%的种子液，在通气量1:0.4-0.6(V.V.M)；压力0.04-0.1MPa，搅拌转速：100-450rpm；温度：25-35℃，发酵60-75h后即可制得黄色短杆菌的细胞发酵液，然后离心分离所得沉淀细胞为催化3-氰基吡啶合成烟酸的催化剂；

所述的种子培养基的配方（g/L）：葡萄糖10-20，酵母膏0.5-3，NaCl 1-2，K₂HPO₄0.1-0.2，MgSO₄0.02-0.04，尿素0.5-0.7，调节pH =7.0-8.0；

所述的发酵培养基的配方（g/L）：甘油5-7，酵母粉1-3，尿素2-4， K₂HPO₄0.5-0.7，MgSO₄0.4-0.7，La（（NO₃)₃1-30ppm，调节pH =6.5-7.5；

（3）催化合成烟酸：将离心所得生物催化剂悬浮于去离子水中，并调节PH =6.5-7.5，得到生物催化剂悬浮液，待用；

  向反应釜中加入反应釜容量50-60%的去离子水， 将一定量的底物3-氰基吡啶和生物催化剂悬浮液加入到反应釜中，充分搅拌，调节pH到6.5-7.5，在温度为26~34℃，进行生物催化反应，底物3-氰基吡啶的起始添加量为80-100g/L反应液，生物催化剂的起始添加量为18-22g/L反应液；

每隔0.8-1.5小时对反应液中的3-氰基吡啶浓度进行检测，当浓度低于0.5g/L后，同时补加底物和生物催化剂，二者的补加的量与起始量一致，连续补加7-9次，反应45-55h后，检测反应液中3-氰基吡啶的浓度，当底物浓度趋向于零时即可终止反应，

将反应液进行离心冷冻结晶，再真空干燥，即可得的烟酰胺成品。

2.根据权利要求1所述的一种稀土金属离子诱导黄色短杆菌催化3-氰基吡啶合成烟酰胺的方法，其特征在于：所述的离心冷冻结晶具体操作如下：将反应液于3000rpm离心20min，取上清液在4℃下冷冻结晶，等析出大量晶体后将混合液于3000rpm下冷冻离心15min得晶体。